[发明专利]猪口蹄疫病毒A型抗体酶联免疫检测试剂盒

权利要求书

1.一种猪口蹄疫病毒A型抗原表位多肽组合物，为序列表中序列1所示的多肽和序列2所示的多肽。

2.根据权利要求1所述的猪口蹄疫病毒A型抗原表位多肽组合物，其特征在于，所述序列1所示的多肽和序列2所示的多肽的质量比为(0.5~1.5)：(0.5~1.5)。

3.一种猪口蹄疫病毒A型抗体酶联免疫检测试剂盒，包括猪口蹄疫病毒抗原表位多肽包被的酶联反应板和酶标记抗抗体；所述猪口蹄疫病毒抗原表位多肽为权利要求1或2所述的猪口蹄疫病毒抗原表位多肽组合物。

4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于：所述酶标记抗抗体的标记酶为辣根过氧化物酶；所述酶标记抗抗体为酶标记兔抗猪IgG多克隆抗体。

5.根据权利要求3或4所述的试剂盒，其特征在于：所述酶联反应板为可拆卸96孔酶标板；所述口蹄疫病毒抗原表位多肽为化学人工合成得到。

6.根据权利要求3或4所述的试剂盒，其特征在于：所述猪口蹄疫病毒A型抗原表位多肽组合物包被的酶联反应板的获得方法是将所述猪口蹄疫病毒A型抗原表位多肽溶于100μl的 pH 2.2的甘氨酸-盐酸缓冲液，然后加到96孔聚苯乙烯酶联反应板，每孔200ng猪口蹄疫病毒A型抗原表位多肽组合物，2~8℃下放置8~12小时使猪口蹄疫病毒抗原表位多肽组合物与酶联反应板充分结合，然后按照300μl/孔加入含有0.01g/ml牛血清白蛋白pH 7.4的PBS缓冲液，37℃封闭处理2~3小时，洗涤后甩干，待酶联反应板干燥后2~8℃密封保存。

7.根据权利要求3或4所述的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒中还含有显色液和终止液；显色液由底物液A液和底物液B液组成，所述底物液A液为含0.0006g/ml过氧化氢尿素的柠檬酸磷酸盐缓冲液，所述底物液B液为0.2mg/ml的四甲基联苯胺溶液；所述终止液为2mol/L的硫酸溶液。

8.根据权利要求3或4所述的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒还包括阴性对照血清、阳性对照血清；所述阴性对照血清为健康猪血清用样品稀释液进行1:20倍稀释制得的；所述阳性对照血清为用口蹄疫A型乳鼠毒对动物进行攻毒后制备的血清用样品稀释液进行适当稀释后的制得的；和/或，所述试剂盒还包括样品稀释液和20倍浓缩洗涤液；样品稀释液为含有0.005g/ml酪蛋白的pH 7.4的PBS缓冲液；所述20倍浓缩洗涤液为0.01 mol/L ，pH7.4，含有体积百分浓度为0.5％的Tween-20的磷酸盐缓冲液。

9.权利要求1所述的猪口蹄疫病毒A型抗原表位多肽组合物在制备检测是否感染动物A型口蹄疫病毒病的试剂盒中的应用；其中，动物A型口蹄疫病毒病为猪A型口蹄疫病毒病。