[发明专利]一种用于鉴定猪繁殖与呼吸综合征病毒和/或非洲猪瘟病毒的试剂盒及其应用

权利要求书

1.一种引物探针组合，其由引物探针组PRRS-F1R1P1和引物探针组ASF-F1R1P1组成；

所述引物探针组PRRS-F1R1P1由引物PRRS-F1、引物PRRS-R1和探针PRRS-P1组成；

所述引物PRRS-F1为序列表的序列1所示的单链核酸分子；

所述引物PRRS-R1为序列表的序列2所示的单链核酸分子；

所述探针PRRS-P1，一个末端具有荧光报告基团，另一个末端具有荧光淬灭基团，核苷酸序列为序列表的序列3所示的单链DNA分子；

所述引物探针组ASF-F1R1P1由引物ASF-F1、引物ASF-R1和探针ASF-P1组成；

所述引物ASF-F1为序列表的序列4所示的单链DNA分子；

所述引物ASF-R1为序列表的序列5所示的单链DNA分子；

所述探针ASF-P1，一个末端具有荧光报告基团，另一个末端具有荧光淬灭基团，核苷酸序列为序列表的序列6所示的单链DNA分子；

所述探针PRRS-P1和所述探针ASF-P1具有不同颜色的荧光报告基团。

2.权利要求1所述的引物探针组合在如下（b1）-（b6）中任一种中的应用：

（b1）鉴定猪繁殖与呼吸综合征病毒和/或非洲猪瘟病毒；

（b2）制备用于鉴定猪繁殖与呼吸综合征病毒和/或非洲猪瘟病毒的试剂盒；

（b3）检测待测样本是否含有猪繁殖与呼吸综合征病毒和/或非洲猪瘟病毒；

（b4）制备用于检测待测样本是否含有猪繁殖与呼吸综合征病毒和/或非洲猪瘟病毒的试剂盒；

（b5）检测待测样本中猪繁殖与呼吸综合征病毒和/或非洲猪瘟病毒的含量；

（b6）制备用于检测待测样本中猪繁殖与呼吸综合征病毒和/或非洲猪瘟病毒含量的试剂盒；

所述应用为非疾病诊断和治疗目的的应用。

3.一种试剂盒，其包括权利要求1所述的引物探针组合；所述试剂盒的功能为如下（c1）或（c2）或（c3）：

（c1）鉴定猪繁殖与呼吸综合征病毒和/或非洲猪瘟病毒；

（c2）检测待测样本是否含有猪繁殖与呼吸综合征病毒和/或非洲猪瘟病毒；

（c3）检测待测样本中猪繁殖与呼吸综合征病毒和/或非洲猪瘟病毒的含量。

4.一种检测待测病毒是否为猪繁殖与呼吸综合征病毒和/或非洲猪瘟病毒的方法，包括如下步骤：以待测病毒的总核酸为模板，采用权利要求1所述的引物探针组合进行数字RT-PCR；如果基于探针PRRS-P1相应的荧光基团的检测结果为阳性、待测病毒为或候选为猪繁殖与呼吸综合征病毒，如果基于探针PRRS-P1相应的荧光基团的检测结果为阴性、待测病毒为或候选为非猪繁殖与呼吸综合征病毒；如果基于探针ASF-P1相应的荧光基团的检测结果为阳性、待测病毒为或候选为非洲猪瘟病毒，如果基于探针ASF-P1相应的荧光基团的检测结果为阴性、待测病毒为或候选为非非洲猪瘟病毒；所述方法为非疾病诊断和治疗目的的方法。

5.一种检测待测样本是否含有猪繁殖与呼吸综合征病毒和/或非洲猪瘟病毒的方法，包括如下步骤：以待测样本的总核酸为模板，采用权利要求1所述的引物探针组合进行数字RT-PCR；如果基于探针PRRS-P1相应的荧光基团的检测结果为阳性、待测样本含有猪繁殖与呼吸综合征病毒，如果基于探针PRRS-P1相应的荧光基团的检测结果为阴性、待测样本不含有猪繁殖与呼吸综合征病毒；如果基于探针ASF-P1相应的荧光基团的检测结果为阳性、待测样本含有非洲猪瘟病毒，如果基于探针ASF-P1相应的荧光基团的检测结果为阴性、待测样本不含有非洲猪瘟病毒；所述方法为非疾病诊断和治疗目的的方法。