[发明专利]一种同时检测青霉和镰刀菌的微滴数字PCR检测方法

权利要求书

1.用于双重微滴数字PCR方法检测青霉和镰刀菌的核酸引物对及探针

其中所述引物对选自以下引物对：

Pen-F：CGACAATACCACTCGAA；

Pen-R：ACTGACCGAAGACGAAGTTGT；

ITS -F：GGATACTTTTGATGCGGTGCCT；

ITS -R：TACTTGTGCGCTATCGGTC；

探针序列为：

Pen-P：CY5-ATGTAAGTTGCGTGTCCAGTCAA-BHQ3；

ITS -P：FAM-TGCTGCTCTAAATGGGAGG-BHQ1。

2.根据权利要求1所述的寡核苷酸引物对及探针，其中所述数字PCR方法为微滴数字PCR法。

3.权利要求1所述的引物对和探针，其中，在探针的3’末端连接有荧光淬灭基团，5’末端连接有荧光报告基团。

4.权利要求3所述的引物对和探针，其中，所述荧光淬灭基团为BHQ、BHQ1、BHQ2或TAMRA，所述荧光报告基团为FAM、HEX或VIC。

5.用于通过双重微滴数字PCR方法检测青霉和镰刀菌的试剂盒，其中所述试剂盒包括权利要求1-4任一项所述的引物对和探针。

6.通过双重微滴数字PCR方法检测青霉和镰刀菌的方法，所述方法包括使用权利要求1-4任一项所述的引物对和探针或者权利要求5中所述的试剂盒，所述方法不用于疾病诊断和治疗目的。

7.权利要求6所述的方法，包括：

(a) 提供双重微滴数字PCR反应的条件；

(b) 使用权利要求1-4任一项所述的引物对和探针或权利要求5中所述的试剂盒，通过双重微滴数字PCR方法进行核酸扩增反应和检测扩增产物。

8.权利要求1-4任一项所述的引物和探针或者权利要求5中所述的试剂盒在检测青霉和镰刀菌的应用，所述应用不用于疾病诊断和治疗目的。