[发明专利]一种鲍氏不动杆菌黄嘌呤脱氢酶突变体及其应用

权利要求书

1.一种鲍氏不动杆菌黄嘌呤脱氢酶突变体，该突变体酶是由ɑ亚基和β亚基构成，其特征在于：所述ɑ亚基的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示，所述β亚基的氨基酸序列如SEQ IDNO：2所示。

2.根据权利要求1所述的鲍氏不动杆菌黄嘌呤脱氢酶突变体，该突变体酶是由ɑ亚基和β亚基构成，其特征在于：所述ɑ亚基为如下(a1)-(a4)中任一；所述β亚基为如下(b)；

(a1)所述ɑ亚基的氨基酸序列为序列表中序列1的第296位的苯丙氨酸替换为亮氨酸后得到的氨基酸序列；

(a2)所述ɑ亚基的氨基酸序列为序列表中序列1的第351位的络氨酸替换为丙氨酸后得到的氨基酸序列；

(a3)所述ɑ亚基的氨基酸序列为序列表中序列1的第392位的丝氨酸替换为丙氨酸后得到的氨基酸序列；

(a4)所述ɑ亚基的氨基酸序列为序列表中序列1的第388位的丙氨酸和第389位的天冬氨酸之间插入由GHFCGLLQLSKRFEQ组成的15个氨基酸多肽片段后得到的氨基酸序列；

(b)所述β亚基的氨基酸序列为序列表中序列2所示的序列。

3.编码权利要求1所述蛋白质的DNA分子。

4.根据权利要求3所述的DNA分子，其特征在于：所述DNA分子包括所述ɑ亚基的编码基因和所述β亚基的编码基因。

5.根据权利要求3-4所述的DNA分子，其特征在于：所述基因为如下1)-8)中任一所示DNA分子：

1)将序列表中序列4的第886-888位的ttt替换为ctg后所得序列所示DNA分子；

2)将序列表中序列4的第886-888位的ttt替换为ctg后所得序列的第1-1500位所示DNA分子；

3)将序列表中序列4的第1051-1053位的tat替换为gca后所得序列所示DNA分子；

4)将序列表中序列4的第1051-1053位的tat替换为gca后所得序列的第1-1500位所示DNA分子；

5)将序列表中序列4的第1174-1176位的tct替换为gca后所得序列所示DNA分子；

6)将序列表中序列4的第1174-1176位的tct替换为gca后所得序列的第1-1500位所示DNA分子；

7)在严格条件下与1)-6)中任一所限定的DNA分子杂交且编码权利要求1所述蛋白的DNA分子；

8)与1)-7)中任一所限定的DNA序列具有90％以上的同源性且编码权利要求1或2所述蛋白质的DNA分子。

6.含有权利要求3-5中任一所述DNA分子的重组载体、表达盒、宿主细胞或重组菌。

7.权利要求1所述的蛋白质在作为黄嘌呤氧化酶中的应用。

8.根据权利要求6所述的应用，其特征在于降解含次黄嘌呤和/或黄嘌呤，以及降解含有次黄嘌呤和/或黄嘌呤的材料中的应用。

9.权利要求2-5中任一所述DNA分子或权利要求6或7所述的重组载体、表达盒、宿主细胞或重组菌在如下任一中的应用：

(a)制备具有黄嘌呤氧化酶活性的产品；

(b)制备既具有黄嘌呤氧化酶活性，也具有黄嘌呤脱氢酶活性的产品。

10.一种制备权利要求1所述蛋白质的方法，是将权利要求3-5中任一所述的核酸分子导入大肠杆菌进行诱导表达，得到所述蛋白质。