[发明专利]一种从九香虫中同时制备五种多巴胺类化合物的分离方法

权利要求书

1.一种从九香虫中同时制备五种多巴胺类化合物的分离方法，其特征在于：它包括如下步骤：

步骤一：以干燥的九香虫药材为原料，粉碎成1-5mm的粗粉，按照重量比例加入2-10倍的70%乙醇溶液，超声提取3次，提取时间分别为60min、45min、30min，合并提取液，过滤、60℃真空浓缩至无醇度，得九香虫提取浓缩液；

步骤二：往步骤一浓缩液中依次加入石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，每个溶剂萃取3次，每次体积为溶液体积的1/3-2/3，收集、合并正丁醇萃取液，60℃真空浓缩至1/10体积；

步骤三：按照重量比，给步骤二浓缩液中加入1-3倍100-300目硅胶拌样，进行硅胶柱层析，氯仿-甲醇梯度洗脱，收集1/5-1/1洗脱馏分，60℃真空浓缩至1/10-1/5体积，得到待制备溶液；

步骤四：将步骤三所得到的待制备溶液用0.45μm有机膜过滤，收集滤液，然后滤液进样，进行九香虫5种单体化合物的制备分离，并针对性的收集纯度大于98.0%的各个单体的制备馏分溶液；在此过程中，紫外检测器设置波长为280nm，进行在线检测；

步骤五：将步骤（4）中进行高效制备液相色谱分离得到的5种制备馏分溶液，分别60℃真空浓缩至干，回收甲醇溶剂，固体放置于65℃干燥箱干燥12小时，即得到

（1）N-[2-(3,4-二羟基苯基)-2-羟基乙基] 乙酰胺；

（2）N-[(E)-2-(3,4-二羟基苯基)乙烯基] 乙酰胺；

（3）反式-2-(3',4'-二羟基苯基)-3-乙酰氨基-7-羟基乙基-1,4-苯并二恶烷；

（4）(2R,3S)-2-(3',4'-二羟基苯基)-3-乙酰氨基-6-(N-乙酰基-2''-氨基乙基)-1,4-苯并二恶烷；

（5）反式-2-(3',4'-二羟基苯基)-3-乙酰氨基-7-(N-乙酰基-2''-氨基乙烯-1-基)-1,4-苯并二恶烷；五种化合物单体。

2.根据权利要求1所述的一种从九香虫中同时制备五种多巴胺类化合物的分离方法，其特征在于：所述步骤四中，制备液相色谱条件为：色谱柱直径为：50mm，色谱柱填料为C18填料，粒径为10μm，柱温为室温，流动相为甲醇-0.1%乙酸水溶液，且两者的体积比为40：60，流速为60ml/min，检测波长为280nm。

3.根据权利要求1所述的一种从九香虫中同时制备五种多巴胺类化合物的分离方法，其特征在于：所述五种单体化合物产品的纯度复检采用反相分析型高效液相色谱，色谱条件为：以C18为填料，粒径为5μm，甲醇-0.1%乙酸水溶液为流动相，两者体积比为40：60，流速1.0ml/min，检测波长280nm。

4.根据权利要求1所述的一种从九香虫中同时制备5种多巴胺类化合物的分离方法，其特征在于：所述五种单体化合物产品同时分离得到的纯度分别达到98.0%。