[发明专利]一种红景天药材指纹图谱测定方法在审
申请号: | 201911100467.2 | 申请日: | 2019-11-12 |
公开(公告)号: | CN112858491A | 公开(公告)日: | 2021-05-28 |
发明(设计)人: | 吴以岭;吴相君;吴瑞;贾振华;孙云波;沈硕;张创峰;毕丹;崔旭盛 | 申请(专利权)人: | 北京以岭药业有限公司 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02;G01N30/06;G01N30/34;G01N30/36;G01N30/74;G01N30/86 |
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地址: | 北京市大兴区中关村科技*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 红景天 药材 指纹 图谱 测定 方法 | ||
1.一种红景天指纹图谱检测方法,其特征在于具体包括以下步骤:
(1)供试品溶液的制备:称定红景天粉末1-3g,加入75%甲醇20 mL于50mL具塞锥形瓶中,称定重量,超声提取15-30 min,再称定重量,用75%甲醇补足减失的重量,摇匀,离心,取上清液0.45 μm微孔滤膜滤过,取续滤液,即得;
(2)对照品溶液的制备:精密称定各对照品适量,置具塞容量瓶中,加75%甲醇溶解,超声制成每1mL75%甲醇中含红景天苷、酪醇、儿茶素、大黄酚-8-O-葡萄糖苷对照品约0.50mg,香草醛、对香豆酸、异槲皮苷、槲皮苷、山奈酚对照品约1.00mg,没食子酸、原儿茶酸、咖啡酸约1.50mg的溶液作为对照品溶液;
(3)色谱参数: RP18色谱柱,柱温25-40°C,流速0.5-1.5mL·min-1,检测波长270-290nm,进样量8-15μL;流动相A为乙腈,B为0.1%冰醋酸水溶液,梯度洗脱程序为0~18min,10%~24% A;18~30 min,24%~25% A;30~45 min,25%~35% A;45~55 min,35%~45% A;55~60 min,45%~55% A;60~65min,55%~95% A;65~70 min,95%~100% A;
(4)指纹图谱的质量控制:按上述色谱条件,将供试品溶液和对照品溶液分别注入高效液相色谱仪检测,将所得色谱图与红景天药材的对照指纹图谱比较,计算相似度,识别所具有的共同吸收峰的数量,确定相似度,实现对红景天药材进行鉴别及质量控制。
2.根据权利要求1所述的红景天指纹图谱检测方法,其特征在于具体包括以下步骤:
(1)供试品溶液的制备:称定红景天粉末1g,加入75%甲醇20 mL于50mL具塞锥形瓶中,称定重量,超声提取15min,再称定重量,用75%甲醇补足减失的重量,摇匀,离心5min,取上清液0.45 μm微孔滤膜滤过,取续滤液,即得;
(2)对照品溶液的制备:精密称定各对照品适量,置具塞容量瓶中,加75%甲醇溶解,超声并制成每1mL75%甲醇中含红景天苷、酪醇、儿茶素、大黄酚-8-O-葡萄糖苷对照品约0.50mg,香草醛、对香豆酸、异槲皮苷、槲皮苷、山奈酚对照品约1.00mg,没食子酸、原儿茶酸、咖啡酸约1.50mg的溶液作为对照品溶液;
(3)色谱参数: RP18色谱柱,柱温30°C,流速1 mL·min-1,检测波长276 nm,进样量10μL;流动相A为乙腈,B为0.1%冰醋酸水溶液,梯度洗脱程序为0~18min,10%~24% A;18~30min,24%~25% A;30~45 min,25%~35% A;45~55 min,35%~45% A;55~60 min,45%~55% A;60~65min,55%~95% A;65~70 min,95%~100% A;
(4)指纹图谱的质量控制:按上述色谱条件,将供试品溶液和对照品溶液分别注入高效液相色谱仪检测,将所得色谱图与红景天药材的对照指纹图谱比较,计算相似度,识别所具有的共同吸收峰的数量,确定相似度,实现对红景天药材进行鉴别及质量控制。
3.根据权利要求1或2所述的红景天药材的指纹图谱检测方法,其特征在于供试品溶液制备的步骤中,红景天粉末需过三号筛。
4.根据权利要求1或2所述的红景天药材的指纹图谱检测方法,其特征在于步骤(1)中,超声功率为500W,频率40kHz;离心参数为3500 r/min。
5.根据权利要求1或2所述的红景天药材的指纹图谱检测方法,其特征在于步骤(3)中,色谱参数为:RP18色谱柱参数为5 µm, 4.6×250 mm。
6.根据权利要求1-5任一项所述的红景天药材指纹图谱检测方法,其特征在于,所述红景天为大花红景天。
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