[发明专利]一种肌酸激酶同工酶检测试剂盒、制备方法及用途

权利要求书

1.一种肌酸激酶同工酶样品稀释液，其中，所述稀释液包括：pH7.2-8.5的缓冲液、离子螯合剂和保护剂，其中，

所述保护剂包含选自由牛血清白蛋白、Casein、复合酶保护剂AFP和复合酶保护剂HPD所组成的组中的一种或多种。

2.根据权利要求1所述的稀释液，其中，所述缓冲液为MOPSO缓冲液；优选的，所述MOPSO缓冲液的pH值为7.2。

3.根据权利要求1-2任一项所述的稀释液，其中，所述保护剂选自牛血清白蛋白、复合酶保护剂AFP和复合酶保护剂HPD，所述离子螯合剂为EDTA；其中，

所述牛血清白蛋白的含量为1％-10％，优选为2-5％，更优选为3％；

所述复合酶保护剂AFP的含量为3-10％，优选为5％；

所述复合酶保护剂HPD的含量为3-10％，优选为5％；

所述EDTA的浓度为5-15mM，优选为10mM。

4.根据权利要求1-3任一项所述的稀释液，其中，所述样品为校准品；优选的，所述校准品为冻干校准品。

5.一种肌酸激酶同工酶检测试剂盒，其中，所述试剂盒包括：包被于磁性微球的第一抗体、标记有示踪标记物的第二抗体和如权利要求1-4任一项所述的肌酸激酶同工酶样品稀释液；其中，

所述第一抗体和所述第二抗体所识别的肌酸激酶同工酶的特异性结合位点不同；

任选的，所述检测试剂盒还包含校准品。

6.根据权利要求5所述的肌酸激酶同工酶检测试剂盒，其中，所述第一抗体为CKMB-BB，所述第二抗体为CKMB-04；优选的，所述磁性微球和第一抗体的质量比为100:0.5-1.25，所述示踪标记物和第二抗体的质量比为15-40:1。

7.根据权利要求5-6任一项所述的肌酸激酶同工酶检测试剂盒，其中，所述示踪标记物选自由鲁米诺、碱性磷酸酶、辣根过氧化物酶、吖啶酯和金刚烷所组成的组中的一种或多种；优选的，所述示踪标记物为吖啶酯。

8.根据权利要求5-7任一项所述的肌酸激酶同工酶检测试剂盒，其中，所述试剂盒还包括：磁性微球清洗液、底物液A和底物液B；其中，所述磁性微球清洗液含有PBST缓冲液，所述底物液A为H₂O₂和HNO₃的混合液，所述底物液B为Triton X-100和NaOH的混合液；优选的，所述H₂O₂的质量分数为0.01-5.0％，所述HNO₃的浓度为0.01-1.0mol/L，所述Triton X-100的质量分数为0.01-2.0％，所述NaOH的浓度为0.05-1mol/L。

9.根据权利要求5-8任一项所述的肌酸激酶同工酶检测试剂盒的制备方法，其中，所述制备方法包括：

磁性微球包被步骤：将所述第一抗体包被于所述磁性微球上；

示踪标记物标记步骤：将所述示踪标记物标记于所述第二抗体上；

制备样品稀释液步骤：将所述样品稀释液中的各组分混合。

10.根据权利要求9所述的肌酸激酶同工酶检测试剂盒的制备方法，其中，

所述磁性微球包被步骤中使用2-(N-吗啉代)乙磺酸作为缓冲液；

任选的，所述磁性微球包被步骤中还使用封闭液，所述封闭液为BSA；

和/或

所述示踪标记物标记步骤中使用4-羟乙基哌嗪乙磺酸作为缓冲液。

11.根据权利要求1-4任一项所述的肌酸激酶同工酶样品稀释液或根据权利要求5-8任一项所述的肌酸激酶同工酶检测试剂盒在制备用于诊断心肌梗死的试剂中的应用。