[发明专利]用于检测赭曲霉毒素A的荧光探针与成套试剂

权利要求书

1.检测赭曲霉毒素A的方法，包括：向待测样品中添加赭曲霉毒素A荧光探针和赭曲霉毒素A抗体，得到待测体系；所述赭曲霉毒素A荧光探针按照包括如下步骤的方法制备得到：将赭曲霉毒素A、N-羟基琥珀酰亚胺、N-(3-二甲氨基丙基)-N'-乙基碳二亚胺盐酸盐与N,N-二甲基甲酰胺反应，然后加入带有氨基基团标记的四甲基罗丹明荧光染料分子衍生物进行反应，得到反应产物，利用高效液相色谱从所述反应产物中分离得到保留时间为6.3分钟、8分钟或9.3分钟的物质，即为所述赭曲霉毒素A荧光探针，高效液相色谱分离纯化条件如下：采用HPLC仪器型号为Hitachi 2000，色谱柱为Symmetry Shield C18 柱，5 μm, 250×4.6mm, GL Sciences Inc.；流动相为溶剂 A 和溶剂B，所述溶剂A为1‰（v/v）甲酸水溶液，所述溶剂B为甲醇；高效液相色谱分离时采用65% （v/v）所述溶剂 A与35% （v/v）所述溶剂B进行等度洗脱，通过560 纳米处吸光度进行检测，其中流速为 1.0 mL/min；所述赭曲霉毒素A抗体为赭曲霉毒素A单克隆抗体；混合赭曲霉毒素A荧光探针和所述赭曲霉毒素A抗体，得到对照体系，所述待测体系与所述对照体系中的所述赭曲霉毒素A荧光探针和所述赭曲霉毒素A抗体均相等；按照包括如下b1）或b2）或b3）的方法确定待测样品中是否含有赭曲霉毒素A：

b1）检测所述对照体系与所述待测体系的荧光强度，如所述待测体系与所述对照体系的荧光强度相等，所述待测样品中不含有赭曲霉毒素A；如所述待测体系的荧光强度小于所述对照体系的荧光强度，所述待测样品中含有赭曲霉毒素A；

b2）检测所述对照体系与所述待测体系的荧光偏振值，如所述待测体系与所述对照体系的荧光偏振值相等，所述待测样品中不含有赭曲霉毒素A；如所述待测体系的荧光偏振值小于所述对照体系的荧光偏振值，所述待测样品中含有赭曲霉毒素A；

b3）检测所述对照体系与所述待测体系的荧光各向异性值，如所述待测体系与所述对照体系的荧光各向异性值相等，所述待测样品中不含有赭曲霉毒素A；如所述待测体系的荧光各向异性值小于所述对照体系的荧光各向异性值，所述待测样品中含有赭曲霉毒素A。