[发明专利]一种大豆SSR标记高通量多重PCR的方法

说明书

本发明公开了一种大豆SSR标记高通量多重PCR的方法，涉及分子生物学DNA标记技术领域。包括大豆SSR标记高通量多重PCR的方法、引物组、试剂盒和应用。本发明基于毛细管四色荧光检测系统的大豆SSR标记多重PCR复合扩增体系，对构建高通量自动检测平台，提高SSR标记检测效率，节约检测成本，指纹图谱构建和品种鉴别具有重要意义。

技术领域

本发明涉及分子生物学DNA标记技术领域，更具体的说是涉及一种大豆SSR标记高通量多重PCR的方法。

背景技术

目前，随着分子生物学技术的发展，SSR标记以其变异丰富、操作简单、结果可靠和重复性好等优点，已被广泛应用于种质资源鉴定、遗传多样性分析、品种纯度及真实性检测、QTL/基因挖掘、品种DNA指纹数据库构建等。每分析一个SSR引物仅能获得单个位点的基因型信息，数据分析的通量较低。建立多重PCR复合扩增体系是提高每次SSR分析的信息量的重要途径。

多重PCR是指在一个PCR体系中同时进行多对引物的扩增，具有时间短、所需试剂少等优点。在大豆上，多重PCR的研究多集中于转基因成分检测方面，对于SSR标记高通量多重PCR体系的研究较少。

因此，构建基于毛细管四色荧光检测系统的多重PCR复合扩增体系，对于建立高通量自动检测平台、提高SSR标记检测效率具有重要意义。

发明内容

有鉴于此，本发明提供了一种大豆SSR标记高通量多重PCR的方法

为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种大豆SSR标记高通量多重PCR的引物组，包括引物对1～引物对10；

引物对1:

F:5’-AGTTAGGGTGATCAGAAAACTGTAA，如SEQ ID NO.1所示；

R:5’-GATTGCTCCAACGTATTAAGCACTT，如SEQ ID NO.2所示；

引物对2:

F:5’-TGAAACCTGGAAAAAGATACGTGTG，如SEQ ID NO.3所示；

R:5’-GTTGAAGGAAATGCTTCAAACCAAC，如SEQ ID NO.4所示；

引物对3:

F:5’-AGTTGGTGTTTTCTTGTGGTTTTCT，如SEQ ID NO.5所示；

R:5’-CGTACTCTGTACTGGGAGCTAATTA，如SEQ ID NO.6所示；

引物对4:

F:5’-TTTATGACTCTTTGCAGCAAGAAGG，如SEQ ID NO.7所示；

R:5’-AATGATCTAATGTGTGACCATGCAC，如SEQ ID NO.8所示；

引物对5:

F:5’-TGCTTCCCTATGCAAAAAGATTGAG，如SEQ ID NO.9所示；

R:5’-TCAAGTATGGTGGAAAACTTGAAGC，如SEQ ID NO.10所示；

引物对6:

F:5’-TCACCTATTTTCAAATTATGCGCTCA，如SEQ ID NO.11所示；

R:5’-ATGGAAATACTGAATGAAAGCATATTG，如SEQ ID NO.12所示；

引物对7: