[发明专利]一种兔抗人肌红蛋白多克隆抗体血清的制备方法在审
申请号: | 201911116283.5 | 申请日: | 2019-11-15 |
公开(公告)号: | CN110746506A | 公开(公告)日: | 2020-02-04 |
发明(设计)人: | 刘永需;柳飞;赵红;孟庆福;罗杰;庄桂玉;吴硕 | 申请(专利权)人: | 青岛康大生物科技有限公司 |
主分类号: | C07K16/18 | 分类号: | C07K16/18;C07K16/06 |
代理公司: | 11574 北京律远专利代理事务所(普通合伙) | 代理人: | 张燕 |
地址: | 266406 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 注射 人肌红蛋白 抗原乳剂 免疫注射 抗原 皮下 多克隆抗体 分离血清 弗氏佐剂 抗体生产 抗体水平 抗原用量 试剂原料 兔耳静脉 血清效价 质量稳定 质量诊断 注射部位 血清 检测 采血 抗体 效价 种兔 足掌 乳化 制备 诊断 服务 生产 | ||
1.一种兔抗人肌红蛋白多克隆抗体血清的制备方法,该方法包括以下步骤:
(1)抗原准备:选用人肌红蛋白抗原,注射前以弗氏佐剂进行乳化得抗原乳剂;
(2)使用上述抗原乳剂对兔进行多次注射;
(3)血清效价检测:最后一次注射后8-10天采血,分离血清,进行效价检测。
2.根据权利要求1所述的兔抗人肌红蛋白抗血清的制备方法,其特征在于,所述注射分六次进行。
3.根据权利要求1或2所述的兔抗人肌红蛋白抗血清的制备方法,其特征在于,第一次注射前乳化用的弗氏佐剂为完全弗氏佐剂,第二次、第三次、第四次、第五次、第六次注射乳化前的弗氏佐剂为不完全弗氏佐剂。
4.根据前述权利要求中任一项所述的兔抗人肌红蛋白抗血清的制备方法,其特征在于,所述乳化时抗原与弗氏佐剂混合比例为1:1。
5.根据前述权利要求中任一项所述的兔抗人肌红蛋白抗血清的制备方法,其特征在于,所述采血前麻醉使用含20%氨基酸甲酯的溶液,注射量控制在1g/kg体重。
6.根据前述权利要求中任一项所述的兔抗人肌红蛋白抗血清的制备方法,其特征在于,采用兔耳静脉取血,取血量保持在2周内体重的1%(即10%总血量)。
7.根据前述权利要求中任一项所述的兔抗人肌红蛋白抗血清的制备方法,其特征在于,血清分离方式为离心分离。
8.根据权利要求7所述的兔抗人肌红蛋白抗血清的制备方法,其特征在于,所述离心分离的条件为:37℃保存30-60分钟,4℃下2000-3000转离心15分钟,取上清4000转离心10分钟,上清液出现浑浊继续取上清4000转离心10分钟。
9.根据前述权利要求中任一项所述的兔抗人肌红蛋白抗血清的制备方法,其特征在于,如若效价达不到要求,可由静脉追加注射1—2次抗原进行免疫强化。
10.根据权利要求1所述的兔抗人肌红蛋白抗血清的制备方法,其特征在于,采用间接酶联免疫吸附法进行血清效价。
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