[发明专利]神经干细胞活性因子复合物纳米微脂囊的应用及其备制

说明书

本发明公开了一种神经干细胞活性因子(hNGF)、番茄红素油树脂复合而成的纳米脂质载体技术(NLC)，利用逆相蒸发－冷冻干燥法制备神经神经干细胞活性因子复合纳米微脂囊。微脂囊粒径为81.62±3.67纳米，成为透过血脑屏障转运的有效载体；基于纳米定向脑、脊髓组织渗透技术，实现将其复合物活性成份快速渗透至脑神经组织，达到显著的激活内源性神经干细胞再生、增值效果，有效提高神经干细胞活性因子复合物的稳定性、延长其作用时间、增强细胞抗氧化作用、维持神经细胞存在、促进神经细胞分化、决定轴突生长方向、诱导突起生长等作用。提供一种因多种原因引起的神经系统损害修复、再生生物制剂。

技术领域

本发明涉及神经干细胞活性因子复合物纳米微脂囊的应用及其制备方法。通过对神经干细胞的培养、鉴定，神经干细胞活性因子的获取，与番茄红素树脂合成复合物，利用纳米脂质载体技术(NLC)逆相蒸发-冷冻干燥法制备神经干细胞活性因子复合物柔性纳米微脂囊，达到显著的激活内源性神经干细胞再生、增值效果，有提高神经干细胞活性因子复合物活性成份稳定性、延长其作用时间、增强细胞抗氧化作用、维持神经细胞存在、促进神经细胞分化、决定轴突生长方向、诱导突起生长等作用。利用其无毒安全、容易实现工业化生产等优点，提供一种因多种原因引起的神经系统损害修复、再生的生物制剂。

背景技术

人的神经元细胞是退出细胞周期的终末分化细胞，长期以来神经系统被认为缺乏再生能力。神经干细胞被广泛发现和证实后，使人们认识到，成体中枢神经系统的可塑性和再生性。神经干细胞活性因子(hNGF)是一类多种肽。主要包括神经生长因子(NGF)、脑性NF(BD-NF)、NFⅢ(NT-3)、胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)、睫状神经因子(CNTF)等。hNGF为水溶性，且相对分子量较大，在自然状态下几乎不能透过血脑屏障。采用乳化聚合法制备 hNGF-PBCA纳米粒，该纳米粒较hNGF更容易透过血脑屏障，达到显著的激活内源性神经干细胞再生、增值效果，和番茄红素树脂形成复合物后，可有提高神经干细胞活性因子复合物活性成份稳定性、延长其作用时间、增强细胞抗氧化作用、维持神经细胞存在、促进神经细胞分化、决定轴突生长方向、诱导突起生长等作用。大量的实验室数据和流行病学结果证明番茄红素是人类已知的自然界抗氧化能力最强的物质。具有强大拮抗氧化应激损伤，保护神经元，改善实验动物的学习、记忆功能；它具有维持交感神经和感觉神经细胞存在、促进神经细胞分化、决定轴突生长方向、促进周围神经再生、促进损伤的中枢神经和外周神经修复、维持生存及诱导突起生长的作用。还有改善神经退行性病变，与炎症、细胞凋亡、氧化应激和线粒体功能障碍等密切相关。

发明内容

本发明的目的在于提供一种神经干细胞活性因子复合物纳米微脂囊，以解决上述技术问题中的至少一个方面。

本发明的第二个目的在于提供上述神经干细胞活性因子复合物纳米微脂囊的制备方法，以解决上述技术问题中的至少一个方面。

本发明的第三个目的在于提供上述神经干细胞活性因子复合物纳米微脂囊应用，以解决上述技术问题中的至少一个方面。

根据本发明的一个方面，本发明提供了一种神经干细胞活性因子复合物纳米微脂囊，主要利用逆相蒸发-冷冻干燥法制备神经干细胞活性因子复合柔性纳米微脂囊，微脂囊其平均粒径为(80.66±3.86)nm，Zeta电位为(61.22 ±7.62)mV，包覆率可以为78.2～90.0％，载药量可以为20.0～25.0％。

所述的神经干细胞活性因子复合物至少有以下一种成分组成：神经干细胞活性因子、番茄红素树脂复合而成：神经干细胞活性因子10μg/L 10～30份、 570mg/L番茄红素树脂的亚麻籽番茄油5～15份。

本发明的神经干细胞活性因子复合物纳米微脂囊，具有以下的有益效果：