[发明专利]一种基于香豆素的检测革兰氏阳性菌的免洗荧光探针及应用

权利要求书

1.基于香豆素的检测革兰氏阳性菌的免洗荧光探针在检测革兰氏阳性菌试剂中的应用，其特征在于探针的结构式如下所示：

。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于探针的制备步骤如下：

（1）将草酰乙二酸二乙酯和3-（二甲基氨基）苯酚或3-（二乙基氨基）苯酚的混合物在120 ℃下搅拌3小时，冷却后，将反应混合物用CH₂Cl₂稀释，将其通过硅胶柱色谱法纯化，得橙色固体；

（2）将步骤（1）得到的橙色固体溶于乙醇中，之后加入氢氧化钠溶液，将得到的混合物回流后冷却至室温，向混合物加入水，调节pH，得到沉淀，将沉淀过滤、洗涤得到荧光探针。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：所述步骤（1）中草酰乙二酸二乙酯和3-（二甲基氨基）苯酚或3-（二乙基氨基）苯酚的摩尔比为1:1。

4.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：所述步骤（2）加入氢氧化钠溶液调节pH至2-3。

5.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：所述步骤（2）中回流时间为3h，pH调节至2-3。

6. 根据权利要求1所述的应用，其特征在于步骤如下：将革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌分别用含有荧光探针的Stock溶液孵育0.5分钟，在405 nm激发下，荧光发射波长收集范围为490-700 nm。

7.权利要求1-6任一项所述的基于香豆素的检测革兰氏阳性菌的免洗荧光探针在监测表面活性剂试剂中的应用。