[发明专利]一株高效分泌表达外源蛋白的解淀粉芽孢杆菌及其应用有效

专利信息
申请号: 201911119213.5 申请日: 2019-11-15
公开(公告)号: CN110760465B 公开(公告)日: 2021-04-09
发明(设计)人: 刘文龙;王兴吉;郭庆文;王克芬;王金余;钱娟娟;佟新伟 申请(专利权)人: 山东隆科特酶制剂有限公司
主分类号: C12N1/20 分类号: C12N1/20;C12N9/54;C12R1/07
代理公司: 北京瑞盛铭杰知识产权代理事务所(普通合伙) 11617 代理人: 栗华楠
地址: 276400 *** 国省代码: 山东;37
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摘要:
搜索关键词: 高效 分泌 表达 蛋白 淀粉 芽孢 杆菌 及其 应用
【权利要求书】:

1.一株分泌表达中性蛋白酶的解淀粉芽孢杆菌,其特征在于,该菌株具体为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)ZD-708∆GA∆EGL,是在ZD-708菌株基础上敲除糖化酶基因GA和纤维素酶基因EGL所得;

所述ZD-708菌株,保藏号为CGMCC NO.18644;

所述纤维素酶基因EGL的核苷酸序列如序列表SEQ ID NO.3所示。

2.如权利要求1所述的分泌表达中性蛋白酶的解淀粉芽孢杆菌,其特征在于,所述糖化酶基因GA的核苷酸序列如序列表SEQ ID NO.2所示。

3.权利要求1所述菌株解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)ZD-708∆GA∆EGL在生产中性蛋白酶中的应用。

4.如权利要求3所述的应用,其特征在于,发酵生产中性蛋白酶的方法如下:将菌种按接种量5%-8%接种至发酵培养基中,置于200rpm-220rpm,35-37℃中,培养80-90h;发酵液上清的中性蛋白酶酶活达到20200-21930U/ml。

5.如权利要求4所述的应用,其特征在于,发酵培养基组成为:麦芽糊精32g/L,玉米粉14g/L,豆饼粉12g/L,酵母粉2.3g/L,Na2HPO44.4g/L,KH2PO45.1g/L,碳酸钙1%,pH7.0。

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