[发明专利]应用纳米磁珠富集尿液沉渣PAX2蛋白作为诊断原发性膀胱输尿管反流生物标志物的用途在审
申请号: | 201911124372.4 | 申请日: | 2019-11-18 |
公开(公告)号: | CN110907650A | 公开(公告)日: | 2020-03-24 |
发明(设计)人: | 徐虹;汪长春;杨雪;范明亮;沈茜;饶佳;许靖;郑鹢冰 | 申请(专利权)人: | 复旦大学附属儿科医院 |
主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68;C07K1/14 |
代理公司: | 天津市尚仪知识产权代理事务所(普通合伙) 12217 | 代理人: | 邓琳 |
地址: | 201102 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 应用 纳米 富集 尿液 沉渣 pax2 蛋白 作为 诊断 原发性 膀胱 输尿管 生物 标志 用途 | ||
1.一种PAX2蛋白作为诊断原发性膀胱输尿管反流生物标志物的用途。
2.根据权利要求1所述的一种PAX2蛋白作为诊断原发性膀胱输尿管反流生物标志物的用途,其特征在于,所述PAX2蛋白来源于尿液沉渣。
3.根据权利要求2所述的一种PAX2蛋白作为诊断原发性膀胱输尿管反流生物标志物的用途,其特征在于,所述PAX2蛋白应用核蛋白裂解后纳米磁珠富集尿液沉渣蛋白获得。
4.根据权利要求3所述的一种PAX2蛋白作为诊断原发性膀胱输尿管反流生物标志物的用途,其特征在于,应用纳米磁珠富集尿液沉渣PAX2蛋白的方法,包括以下步骤:
a.在非感染急性期留取患儿尿液,测尿肌酐以明确尿液浓度;
b.尿液于4℃,1000-1500rpm,离心30-45min留取尿沉渣,加入1-1.5ml PBS清洗沉渣中杂质,4℃,1000-1500rpm,离心5-10min,共清洗2次;
c..将清洗后的尿沉渣提取尿液沉渣核蛋白,测定蛋白浓度;
d.提取后的核蛋白应用PAA-MSP纳米磁珠富集蛋白,上清浓缩后用于Western Blot检测PAX2蛋白的表达。
5.根据权利要求3所述的一种PAX2蛋白作为诊断原发性膀胱输尿管反流生物标志物的用途,其特征在于,应用纳米磁珠富集尿液沉渣PAX2蛋白的方法,包括以下步骤:
a.在非感染急性期留取患儿尿液,测尿肌酐以明确尿液浓度;
b.尿液于4℃,1200rpm,离心40min留取尿沉渣,加入1ml PBS清洗沉渣中杂质,4℃,1200rpm,离心10min,共清洗2次;
c..将清洗后的尿沉渣提取尿液沉渣核蛋白,测定蛋白浓度;
d.提取后的核蛋白应用PAA-MSP纳米磁珠富集蛋白,上清浓缩后用于Western Blot检测PAX2蛋白的表达。
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