[发明专利]应用纳米磁珠富集尿液沉渣PAX2蛋白作为诊断原发性膀胱输尿管反流生物标志物的用途

说明书

本发明公开了一种PAX2蛋白作为诊断原发性膀胱输尿管反流生物标志物的用途。所述PAX2蛋白来源于尿液沉渣。所述PAX2蛋白应用核蛋白裂解后纳米磁珠富集尿液沉渣获得。尿沉渣PAX2检测是VUR高度相关因素，在VUR诊断中有较高的价值，是VUR较可靠的生物标志物。本发明检测患儿尿液中的蛋白指标，属无创性检查，不会对患儿造成有创伤害；本发明标本为尿液，留取容易且操作简单，可重复性高。

技术领域

本发明涉及生物标志物领域，具体是一种应用纳米磁珠富集尿液沉渣 PAX2蛋白作为诊断原发性膀胱输尿管反流生物标志物的用途。

背景技术

膀胱输尿管反流(VUR)是常见的先天性肾脏和尿路畸形(Congenital anomaliesof the kidney and urinary tract，CAKUT)，原发性的膀胱输尿管反流由先天性膀胱输尿管连接处瓣膜发育缺陷所致，在健康儿童中患病率约 1％～2％，而在产前肾盂积水的新生儿中和尿路感染(Urinary tract infection， UTI)患儿中患病率分别高达19％和25％。

VUR一方面具有高UTI风险，5％～10％的患儿可发生持续肾脏损害和肾脏疤痕形成，进而形成反流性肾病(RN)，最终可能导致终末期肾病(End renal stage disease，ESRD)；另一方面其早期诊断的困难，特别新生儿期诊断是国内外儿童肾脏病和泌尿外科专家们关注和研究的热点。排泄性膀胱尿路造影(MCU)是VUR诊断及分级的金标准，但操作具有侵入性，存在放射性暴露，家长心理负担重这些缺点使得MCU该项检查的依从性受到很大影响；99mTc-放射性核素肾静态扫描(DMSA)是目前诊断急性肾盂肾炎 (APN)、检测肾疤痕和评估分肾功能的金标准，申请人前期研究提示在发热性尿路感染急性期，DMSA在检出肾损害的同时对高级别VUR有较好的预测能力，这在一定程度上可减少MCU的使用，但DMSA在预测高级别VUR上仍存在一定假阴性，且DMSA费用较昂贵，对仪器技术要求较高，使得广泛开展受限。

由于VUR可以引起肾盂肾炎、肾疤痕乃至慢性肾衰竭，对VUR的早期发现和早期诊断是CAKUT防治的重点。由于VUR早期缺乏特异性的临床表现，目前诊断检查仍主要以有创性MCU为主。为减少发现和诊断VUR 的有创检测，学者已研究其发病相关生物标志物，而对尿液中已知候选相关生物标志物的确定以及未知生物标志物的筛选及深入研究，势必能提出易于推广普及的无创的检测手段，从而改善患儿的预后和生活质量。在对泌尿系统疾病的研究中，尿液被公认为具有特有的诊断价值，方便收集，可无创获得且稳定，使得近年来国内外学者逐步开始研究VUR的早期尿液的分子诊断策略，研究VUR尿液生物标志物以早期、最小创伤地诊断VUR。

目前报道的VUR生物标志物研究主要集中在炎症细胞相关因子IL-6、 IL-8，尿路上皮相关蛋白(UPIII mRNA、UpIb mRNA)，肾脏纤维化相关分子MMP9及其抑制剂TIMP1等。其中相关的研究提示IL-6、IL-8等主要与肾损伤相关，与VUR无明显相关性；UpIb mRNA相关的研究提示UPIb 可作为首次UTI发作后预测其反复UTI发作的参考，与VUR无明确的相关性；MMP-9和TIMP-1为纤维化相关指标，研究表明该指标可能与肾疤痕相关；对UPIII mRNA在高级别反流患儿中增高，尿NAG(尿N-乙酰氨基葡萄糖苷酶)在高级别反流患儿中降低，对这两个指标的研究中，研究对象选取仅为高级别VUR患儿，因此相关指标与低级别反流的相关性目前尚未明确。

发明内容

本发明就是为了解决上述技术问题，所提出一种应用纳米磁珠富集尿液沉渣PAX2蛋白作为诊断原发性膀胱输尿管反流生物标志物的用途。

本发明是按照以下技术方案实现的。

一种PAX2蛋白作为诊断原发性膀胱输尿管反流生物标志物的用途。

进一步的，所述PAX2蛋白来源于尿液沉渣。

进一步的，所述PAX2蛋白应用核蛋白裂解后纳米磁珠富集尿液沉渣获得。