[发明专利]一种羊膜材料及其制备方法

说明书

本发明公开了一种羊膜材料及其制备方法，包括以下步骤：(1)取羊膜，使用无菌缓冲溶液清理表面残留的血液及污渍；(2)将步骤(1)清洗后的羊膜置于pH为6.9～7.4，含有质量百分比为0.5～5％的原花青素的交联缓冲溶液中进行交联；(3)用清洗缓冲液淋洗处理后的羊膜；(4)将淋洗后的羊膜裁剪为所属尺寸后进行冷冻干燥处理；(5)对干燥后的羊膜进行灭菌。本发明方法操作工艺简便，不需特殊仪器，便于规模化生产；通过使用原花青素进行交联并优化其使用条件，能有效克服使用化学交联剂处理带来的毒性问题，得到的羊膜材料保留良好组织相容性能和活性，更具有强度佳、保质期长等优点，具有重要的医用及经济价值。

技术领域

本发明属于生物材料技术领域，涉及一种羊膜材料；具体涉及一种羊膜材料及其制备方法。

背景技术

羊膜是一类无淋巴管神经及血管，无免疫原性的生物膜。羊膜具备显著的抗纤维化特性，对新生血管以及感染具有明显的抑制功能。羊膜富含IV、V型胶原、碱性成纤维细胞生长因子(BFGF)、转化生长因子-β(TGF-β)、转化生长因子-α(TGF-α)、表皮生长因子(EGF)等，能显著促进上皮细胞的生长、增殖和分化，利于上皮类创伤的愈合。此外，羊膜富含蛋白抑制类生物因子，可以抑制胶原纤维过度增生，预防组织粘连。并且羊膜的来源途径广泛、包括人在内的胎生的哺乳动物生产时均具有胎盘，作为生产后的废弃物，胎盘(羊膜)的取材操作简洁且成本低，因此在眼表损伤修复、皮肤损伤/烧伤修复、肌腱重建、外科手术防黏连等领域具有极大应用前景。

然而，目前临床使用的羊膜材料主要是从产妇资源捐献的胎盘剥离而来，一般是未经处理，质地较薄，机械强度较差，容易卷曲，易撕裂，临床使用操作不便利且短期内会溶解而失去功能，因此临床操作常采用缝合及多次/多层贴敷的方法以满足长时间使用的需求。为解决此问题，有研究及专利报道使用化学试剂，如戊二醛、甲醛等，对羊膜进行化学交联，虽然可以一定程度提升羊膜的力学强度，但化学交联试剂的残留会引起生物毒性，限制了其临床的使用。

发明内容

针对上述问题，本发明的目的是提供一种安全性好，组织相容性、力学强度佳的羊膜材料及其制备方法。

为实现上述目的，本发明采取的技术方案为：一种羊膜材料的制备方法，包括以下步骤：

(1)取羊膜，使用无菌缓冲溶液清理羊膜表面残留的血液及污渍；

(2)将步骤(1)清洗后的羊膜置于pH值为6.9～7.4，含有质量百分比为0.5～5％的原花青素的交联缓冲溶液中；

(3)用清洗缓冲液淋洗处理后的羊膜；

(4)将淋洗后的羊膜裁剪为所属尺寸后进行冷冻干燥处理；

(5)对干燥后的羊膜进行灭菌。

本发明的羊膜材料制备方法简单便捷，处理过程无需使用酸碱、有机溶剂及化学试剂对组织进行处理，尽量保留天然羊膜的致密结构及生物特性。另外，本发明方法使用天然提取物原花青素代替传统的化学交联剂，更温和，进一步避免了因为化学交联剂残留带来的生物毒性。另外，区别于其它的可与组织相互作用的天然试剂，如番茄红素或虾青素，原花青素具有更好的水溶性，可以更好的与羊膜通过产生多重氢键相互作用，在更少的影响羊膜活性基础上，保留羊膜良好的组织相容性且对羊膜的力学性质进行有效提升。交联处理羊膜的条件将直接影响到样品的理化性质和生物功能，为了得到力学性质良好且最大可能保护羊膜所含生物活性分子以提高其生物功能，通过实验发现使用原花青素的质量百分比为0.5～5％(原花青素质量百分含量达到5％基本饱和)，在较好地保持羊膜原有结构和活性、延长保质期的同时，能够显著提高制备得到的羊膜材料的力学强度。

作为本发明的优选实施方式，所述羊膜为经健康人胎盘或动物胎盘剥离得到；所述胎盘为新鲜胎盘或经冷冻保藏后室温解冻后的胎盘；所述动物包括猪或牛。