[发明专利]腺病毒和轮状病毒量子点联检试纸条及制备方法和应用有效

专利信息
申请号: 201911125031.9 申请日: 2019-11-18
公开(公告)号: CN110940806B 公开(公告)日: 2021-05-11
发明(设计)人: 潘庆军;吴平;蒋娜;张莉芳;王思捷;李新新;吴晗 申请(专利权)人: 广东医科大学附属医院
主分类号: G01N33/569 分类号: G01N33/569;G01N33/58
代理公司: 广州三环专利商标代理有限公司 44202 代理人: 郝传鑫;王兰兰
地址: 524001 广*** 国省代码: 广东;44
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摘要:
搜索关键词: 病毒 轮状病毒 量子 联检 试纸 制备 方法 应用
【权利要求书】:

1.一种腺病毒和轮状病毒抗原量子点联检试纸条,其特征在于,包括底板,以及在所述底板上从左往右依次搭接的样本垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫,所述结合垫上包被有被量子点标记的腺病毒检测抗体和被量子点标记的轮状病毒检测抗体;

所述硝酸纤维素膜设置有检测线1、检测线2和质控线,所述检测线1上包被有腺病毒捕获抗体,所述检测线2上包被有轮状病毒捕获抗体;所述质控线上包被有羊抗鼠lgG;

所述被量子点标记的腺病毒检测抗体和被量子点标记的轮状病毒检测抗体采用量子点复溶液稀释后再按一定比例混合后包被到结合垫上;

所述量子点复溶液为含有松二糖2-15wt%、吐温-60 0.01-0.15wt%、氨基乙酸0.1-1.5wt%、庆大霉素0.5-2.5wt%和ProClin 200 0.02-0.15v%的磷酸盐缓冲液;

所述样本垫经样本垫处理液处理后,烘干制得;所述样本垫处理液为含聚乙烯吡咯烷酮0.1-1wt%、聚乙二醇-600 0.5-3wt%、Triton-100 0.5-3wt%和乙醇胺0.5-3wt%的磷酸盐缓冲液。

2.如权利要求1所述的试纸条,其特征在于,所述量子点为羧基水溶性量子点或聚乙二醇功能化水溶性量子点,粒径12nm-18nm,最大发射波长在600-630nm,激发波长450nm。

3.一种制备如权利要求1-2任一所述的腺病毒和轮状病毒抗原量子点联检试纸条的方法,其特征在于,包括以下步骤:

将所述样本垫采用样本垫处理液处理,烘干;

将腺病毒检测抗体和轮状病毒检测抗体以共价偶联的方式偶联到量子点上;将上述量子点采用量子点复溶液稀释后包被到结合垫上;

使用抗体稀释缓冲液将腺病毒捕获抗体、轮状病毒捕获抗体以及羊抗鼠IgG抗体稀释后分别包被到硝酸纤维素膜的检测线1、检测线2和质控线上;

在底板上从左往右依次相互交错地贴上样本垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫,即得到量子点免疫层析试纸条。

4.如权利要求3所述的制备腺病毒和轮状病毒抗原量子点联检试纸条的方法,其特征在于,所述将腺病毒检测抗体和轮状病毒检测抗体以共价偶联的方式偶联到量子点上的具体过程为:

使用第一缓冲液重悬量子点,加入活化剂活化量子点,室温避光活化反应;

纯化得到的所述量子点,使用第一缓冲液重悬,再加入腺病毒检测抗体,混匀;

加入封闭液封闭,封闭后再次纯化,使用第二缓冲液重悬量子点,得到量子点标记的腺病毒检测抗体,备用;

按照同样的方法将轮状病毒检测抗体标记在量子点上。

5.如权利要求1-2任一所述的试纸条在制备检测或辅助检测腺病毒抗原和轮状病毒抗原试剂盒中的应用。

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