[发明专利]基于木瓜蛋白酶为模板的荧光铂纳米簇、制备方法及其应用在审
申请号: | 201911126896.7 | 申请日: | 2019-11-18 |
公开(公告)号: | CN110804435A | 公开(公告)日: | 2020-02-18 |
发明(设计)人: | 王宝娟;常欣;陈杰;吴爽;高鹏;吴雨芬;王源秀 | 申请(专利权)人: | 安徽师范大学 |
主分类号: | C09K11/02 | 分类号: | C09K11/02;C09K11/87;C12Q1/34;C12Q1/37;G01N21/64;B82Y30/00 |
代理公司: | 温州市品创专利商标代理事务所(普通合伙) 33247 | 代理人: | 洪中清 |
地址: | 241000*** | 国省代码: | 安徽;34 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 基于 木瓜蛋白酶 模板 荧光 纳米 制备 方法 及其 应用 | ||
1.一种荧光铂纳米簇在溶菌酶检测中的应用,其特征在于所述纳米簇以木瓜蛋白酶作为模板和还原剂。
2.根据权利要求1所述的一种荧光纳米簇在溶菌酶检测中的应用,其特征在于所述纳米簇的制备方法为将木瓜蛋白酶的水溶液与高价铂配合物的水溶液进行混合,然后加NaOH溶液调节pH值为8~13,避光水浴反应完全后即得。
3.根据权利要求2所述的一种荧光纳米簇在溶菌酶检测中的应用,其特征在于所述纳米簇的制备方法包括如下步骤:
(1)制备25-50mg/mL的木瓜蛋白酶水溶液;
(2)制备浓度为25-100mM的H2PtCl6的水溶液;
(3)将H2PtCl6溶液加入木瓜蛋白酶水溶液中,使其中的木瓜蛋白酶与H2PtCl6两者的摩尔比为1.5:1-10.5:1,充分混匀;
(4)向步骤(3)得到的混合溶液中添加NaOH调节溶液的pH值至8-13,涡旋器充分混匀5-10min;
(5)将步骤(4)得到的混合溶液在25℃~65℃条件下水浴6~48h后即得。
4.根据权利要求1所述的荧光铂纳米簇在溶菌酶检测中的应用,其特征在于其检测溶
菌酶的方法为包括如下步骤:
(1)将荧光铂纳米簇溶液和不同浓度的溶菌酶溶液混合,采用荧光分光光度计分别检测各混合溶液的荧光强度值,绘制各溶液荧光强度值和与之对应的不同浓度的溶菌酶溶液之间的标准曲线;
(2)将荧光铂纳米簇溶液和待测样品进行混合,检测加入待测样品后的溶液的荧光强度值,将数值带入上述标准曲线计算即可得到待测样品中的溶菌酶浓度值。
5.根据权利要求1所述的荧光铂纳米簇在溶菌酶检测中的应用,其特征在于其检测溶
菌酶的线性范围为10 μg/mL-200 μg/mL,检测限为0.55 μg/mL。
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