[发明专利]3位氟甲基取代的香豆素类化合物的制备方法及荧光探针

权利要求书

1.一种式I化合物的制备方法，其特征在于，包括步骤：

(a)在惰性溶剂中，在Eosin Y和添加剂存在下，式II化合物与式III化合物在蓝光光照下发生反应，得式I化合物，

其中，

A选自下组：CH₂F或CHF₂；

X选自下组：O、NH或S；

R选自下组：H或酶识别基团；

所述酶识别基团为能够被酶识别并与所述酶的靶向识别基团相互作用，从而产生-XH的基团；

R¹、R²、R³、R⁴各自独立地选自：氢、卤素、取代或未取代的C1-C6烷基、取代或未取代的C1-C6烯基、取代或未取代的C1-C6炔基、取代或未取代的C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷基、取代或未取代的C6-C10芳基、C6-C10卤代芳基，或取代或未取代的C3-C10环烷基；

如未特别说明，所述“取代”是指基团上的一个或多个氢被选自下组的基团取代：H、-OH、-NH₂、卤素、氧代(＝O)、C1-C6烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、C1-C3烷氧基、C1-C3卤代烷基、-COOH、苯基或苄基；

M为配对阳离子；

且所述添加剂选自下组：氧化剂、碱金属盐、碱土金属盐，或其组合。

2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述氧化剂选自下组：过氧叔丁醇、过氧化氢、高碘酸钠、高碘酸钾，或其组合，较佳地，过氧叔丁醇。

3.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述式I化合物具有式Ia结构：

其中，R、X、A如上定义。

4.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(a)具有一个或多个下述特征：

(1)所述光照的光源为蓝色LED；

(2)所述光照的光源的功率为10-50W，较佳地，15-30W，更佳地，15-25W；

(3)所述反应的时间为2-24h，较佳地，12-24h，更佳地，14-18h；

(4)所述反应的温度为4-30℃，较佳地，20±5℃；和/或

(5)所述惰性溶剂选自：二甲基亚砜、乙腈、二氯甲烷、水，较佳地，二甲基亚砜。

5.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述添加物为氧化剂，所述Eosin Y与氧化剂的摩尔比为1:1-100，较佳地，1：3-50，更佳地，1:20-45。

6.一种酶检测荧光探针，所述荧光探针具有式I化合物结构：

其中，

A选自下组：CH₂F或CHF₂；

X选自下组O、NH或S；

R选自下组：β-半乳糖苷酶(β-galactosidase,β-gal)识别基团、碱性磷酸酶(alkalinephosphatase,ALP)识别基团或谷氨酰转肽酶(γ-GT,GGT)识别基团，

R¹、R²、R³、R⁴各自独立地选自：氢、卤素、取代或未取代的C1-C6烷基、取代或未取代的C1-C6烯基、取代或未取代的C1-C6炔基、取代或未取代的C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷基、取代或未取代的C6-C10芳基、C6-C10卤代芳基，或取代或未取代的C3-C10环烷基；

如未特别说明，所述“取代”是指基团上的一个或多个氢被选自下组的基团取代：H、-OH、-NH₂、卤素、氧代(＝O)、C1-C6烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、C1-C3烷氧基、C1-C3卤代烷基、-COOH、苯基或苄基。

7.如权利要求6所述的荧光探针，其特征在于，所述式I化合物具有式Ia结构：

其中，R、X、A如上定义。