[发明专利]一种弗氏链霉菌及其在泰乐菌素发酵时的应用

权利要求书

1.一种弗氏链霉菌（Streptomyces fradiae）SF-4，其特征在于：所述弗氏链霉菌（Streptomyces fradiae）SF-4于2019年10月9日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：M2019791。

2.权利要求1所述的弗氏链霉菌（Streptomyces fradiae）SF-4在泰乐菌素发酵中的应用。

3.一种基于权利要求1所述的弗氏链霉菌（Streptomyces fradiae）SF-4制备泰乐菌素的方法，其特征在于：所述方法包括以下步骤：

1）一级种子液培养：将含有权利要求1所述的弗氏链霉菌（Streptomyces fradiae）SF-4的斜面孢子用接种环刮下，制备成孢子悬液接种至一级种子培养基，震荡培养36-48h，得到一级种子液；

2）二级种子罐培养：待一级种子发酵至稳定期后，以2%-5%的接种量接种至二级种子罐中培养，二级种子罐培养20-30h，得到二级种子液；

3）发酵培养：将二级种子液以5-10%的接种量接种至发酵培养基，发酵130-140h后，检测发酵液中A组分和C组分的含量，当C组分不低于10%时，在发酵液中补加铵盐，将C组分转化至A组分；待C组分低于10%时，对发酵液的温度升温至36-38℃，升温时间是5-10h；待C组分低于1%时停止发酵并放罐；

所述一级种子培养基的组成为：花生饼粉5-8g/L，酵母浸粉3-5g/L，玉米浆5-7g/L，豆油10-12g/L，碳酸钙2-3g/L，所述一级种子培养基的pH是7.2-7.3；

所述一级种子液培养的培养温度是30℃，转速220r/min；

所述二级种子罐所采用的培养基的组成为：麸质粉12-15g/L，棉籽饼粉10-15g/L，豆饼粉10-15g/L，玉米浆5-10g/L，豆油15-20g/L，磷酸氢二铵 0.3-0.5g/L，碳酸钙 2-4g/L，所述二级种子罐所采用的培养基的pH是7.2-7.3；

所述二级种子罐培养的发酵温度为30℃，发酵开始至第10h的转速是100r/min，通气量0.4vvm，从第11h至发酵结束的转速200r/min，通气量0.6vvm；

所述发酵培养基的组成为：麸质粉16-18g/L，豆饼粉6-7g/L，鱼粉7-10g/L，豆油15-20g/L，盐酸甜菜碱 0.6-0.7g/L，玉米粉12-15g/L，磷酸氢二铵0.1-0.15g/L，氯化钠1-1.2g/L，氯化钾1-1.2g/L，氯化钴6-9mg/L，硫酸镍8-9mg/L，七水硫酸镁0.6-0.8g/L，碳酸钙2.5-3g/L，所述发酵培养基的pH是7.2-7.3；

所述发酵培养时0h至升温前罐温为30℃，0-35h的通气量为0.5vvm，转速是120r/min；从第36h-140h的通气量为1vvm，转速从120r/min上升至450r/min，以保证DO值不低于20%；从第141h至发酵结束的通气量为0.8vvm，转速是350r/min，所述铵盐是硫酸铵、氯化铵或硝酸铵中的一种。