[发明专利]海洋青霉倍半萜内酯抗肿瘤活性物质及制备和用途

权利要求书

1.一种海洋青霉倍半萜内酯抗肿瘤活性物质，其特征在于，所述活性物质为青霉倍半萜内酯A，其化学结构式为：

。

2.权利要求1所述的一种海洋青霉倍半萜内酯抗肿瘤活性物质的制备方法，其特征在于，通过以下步骤实现：

(1) 朱黄青霉培养物的制备

将海洋朱黄青霉的菌株接种到含有液体培养基的三角烧瓶中，将含有朱黄青霉的菌种培养液在室温条件下振荡培养后得到菌种液，最后将菌种液转入含有固体培养基的三角烧瓶中，室温静置培养后，得到含有活性物质青霉倍半萜内酯A的培养物；所述海洋朱黄青霉，其分类命名为Penicilliumminioluteum ZZ1657，已被中国典型培养物保藏中心保藏，保藏编号: CCTCC NO：2019906，保藏日：2019.11.8；保藏地址：中国.武汉.武汉大学；所述液体培养基为马铃薯葡萄糖培养基：土豆200 g、葡萄糖20 g、水1 L；所述的固体培养基为大米培养基：大米40 克和3.5%海盐水 60毫升；所述的室温为20-30℃；所述液体培养基 培养时间为3-5天，固体培养基培养时间为26-30天；

(2) 青霉倍半萜内酯A的提取分离纯化

将上述步骤(1)获得的培养物用乙酸乙酯提取得到乙酸乙酯提取物，将乙酸乙酯提取物先用硅胶柱层析分离，用环己烷和乙酸乙酯混合溶剂梯度洗脱，收集洗脱液，用高效液相色谱检测各组分，合并含有相同成分的组分，得到A-D四个组分，组分D再用十八烷基硅烷键合硅胶柱层析分离，分别用60%、70%和80%的甲醇洗脱，得到D₁-D₃三个组分，最后，组分D₂用高效液相色谱分离纯化得到青霉倍半萜内酯A纯化合物；所述的硅胶柱层析的硅胶用量与上柱的样品量比例是10-15 g:1.0 g；所述的环己烷和乙酸乙酯混合溶剂体积比为10:1，5:1，2:1，1:1；所述的十八烷基硅烷键合硅胶的用量与上柱的样品量比例是20-30 g:1.0 g；所述的高效液相分离条件是：安捷伦Zorbax SB-C₁₈色谱柱 280×9.4 mm, 5 μm，乙腈和水为流动相体积比为53/47，检测波长210 nm，流速为1.0 mL/min；

(3) 青霉倍半萜内酯A的结构鉴定

根据紫外光谱、红外光谱、一维和二维核磁共振光谱、高分辨质谱数据、和单晶X-射线衍射方法，确定青霉倍半萜内酯A的结构。

3.权利要求1所述的活性物质在制备抗肿瘤药物中的应用，其特征在于，所述活性物质为青霉倍半萜内酯A。