[发明专利]海洋青霉倍半萜内酯抗肿瘤活性物质及制备和用途

说明书

本发明提供一种海洋青霉倍半萜内酯抗肿瘤活性物质及制备和用途，所述海洋青霉倍半萜内酯为青霉倍半萜内酯A。本发明利用源自海洋沉积物中的朱黄青霉的大米培养制备获得青霉倍半萜内酯A，朱黄青霉，分类命名为Penicillium minioluteum ZZ1657。所述青霉倍半萜内酯A显著抑制肿瘤细胞的增殖，具有降低肿瘤细胞葡萄糖消耗和乳酸生成从而抑制肿瘤细胞的异常糖酵解代谢途径的作用机制，在制备抗肿瘤药物方面具有应用前景。青霉倍半萜内酯A的化学结构式为：

技术领域

本发明属医药领域,涉及从海洋朱黄青霉Penicillium minioluteum ZZ1657的代谢产物中获得的海洋青霉倍半萜内酯，尤其涉及海洋青霉倍半萜内酯抗肿瘤活性物质，以及其制备方法和在制备抗肿瘤药物中的应用。所述海洋青霉倍半萜内酯为海洋青霉倍半萜内酯A(Penicisesquiterpenoid A)。

背景技术

肿瘤是一类世界范围内严重威胁人类健康的最常见、最严重也是最难以有效治疗的重大疾病之一。临床上通过手术，结合放疗和药物是目前肿瘤治疗最为常见的方法。药物治疗在肿瘤的预防和治疗中具有重要的意义。但是，传统的抗肿瘤化疗药多有疗效有限、毒副作用大和严重耐药性的不足。尽管分子靶向药物为肿瘤的治疗开辟了新途径，但是，也存在疗效有限和容易产生耐药性的严重问题。显然，临床上需要疗效更好、安全性更高和作用机制独特的新型抗肿瘤药物。

海洋特殊的物理化学环境以及生物多样性和复杂性,迫使海洋微生物具有与陆地微生物不同的新陈代谢途径、生存繁殖方式和适应机制，因而产生许多陆地微生物无法产生的化学结构新颖和生物活性独特的代谢产物，是发现抗肿瘤药或药物先导化合物的重要资源。

肿瘤细胞代谢重编程为新型抗肿瘤药物的研究与开发提供了新靶标。大量研究证明，肿瘤细胞高葡萄糖的消耗和高乳酸的生成是肿瘤细胞异常糖酵解的重要特性，活性物质对肿瘤细胞葡萄糖消耗和乳酸生成的改变可反映其对肿瘤细胞异常糖酵解代谢途径的影响。降低肿瘤细胞葡萄糖的高消耗和乳酸的高生成就可抑制肿瘤细胞的异常糖酵解代谢途径，从而抑制肿瘤细胞的增殖和生长。

发明内容

本发明的第一个目的是提供一种海洋青霉倍半萜内酯抗肿瘤活性物质，具体为青霉倍半萜内酯A(Penicisesquiterpenoid A),其化学结构式为：

本发明的第二个目的是提供青霉倍半萜内酯A的制备方法，通过以下步骤实现：

(1)朱黄青霉的分离培养

取空气干燥的海底沉积物用灭菌自来水稀释成一定的浓度，取一定量的样品稀释液均匀分散到含有固体培养基的培养皿中，在室温条件下培养一定时间后,将不同的菌落分别转移到另一含有固体培养基的培养皿中，在室温条件下继续培养一定时间。最后将ZZ1657的单一菌落接种到斜面培养基培养后置4℃冰箱保存备用。

所述的海底沉积物是从浙江省舟山市枸杞岛附近的海域(30°29′9N和122°59′52E)获得；所述样品稀释液的浓度为1×10^-4～1×10^-2g/mL；所述样品稀释液的取样量为200μL；所述培养皿和斜面培养的固体培养基均为马铃薯葡萄糖琼脂培养基；所述的室温培养温度为20～30℃；所述的培养时间为6～10天。

(2)朱黄青霉的菌种鉴定

上述步骤(1)分离培养所获得的菌株ZZ1657用目前实验室普遍使用的内转录间隔区(Internal Transcribed Spacer,ITS)DNA序列分析方法鉴定其种类，确定为朱黄青霉，分类命名为Penicillium minioluteum ZZ1657，已被中国典型培养物保藏中心-武汉中心保藏，保藏编号:CCTCC NO：M 2019906，保藏日：2019.11.8；保藏地址：中国.武汉.武汉大学。