[发明专利]一种β-葡萄糖苷酶及其制备方法与应用在审
| 申请号： | 201911146480.1 | 申请日： | 2019-11-21 |
| 公开（公告）号： | CN111304182A | 公开（公告）日： | 2020-06-19 |
| 发明（设计）人： | 樊明涛;张杰;赵宁;戚一曼 | 申请（专利权）人： | 西北农林科技大学 |
| 主分类号： | C12N9/42 | 分类号： | C12N9/42;C12N15/56;C12N15/70;C12G1/022 |
| 代理公司： | 西安恒泰知识产权代理事务所 61216 | 代理人： | 史玫 |
| 地址： | 712100 陕*** | 国省代码： | 陕西;61 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 葡萄 糖苷酶 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种β-葡萄糖苷酶，其特征在于，所述β-葡萄糖苷酶的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。
2.权利要求1所述β-葡萄糖苷酶的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)基因组DNA的提取：提取酒类酒球菌SD-2a的基因组DNA；
(2)目的基因扩增：以步骤(1)得到的基因组DNA为模板，进行聚合酶链式反应，扩增目的基因；
(3)载体构建：将扩增得到的目的基因插入表达载体PcoldI构建表达质粒PcoldI-0224；
(4)转化：将表达质粒PcoldI-0224导入大肠杆菌感受态细胞DH5α，得到转化子；
(5)表达：将转化子进行扩大培养，提取培养物中的重组表达质粒PcoldI-0224导入感受态细胞BL21，之后进行扩大培养；
(6)纯化：对步骤(5)的培养物依次进行裂解、过滤，之后依次采用His重力镍柱和超滤管收集β-葡萄糖苷酶。
3.如权利要求2所述的β-葡萄糖苷酶的制备方法，其特征在于，步骤(1)中提取对数中期酒类酒球菌SD-2a的基因组DNA。
4.如权利要求2中所述的β-葡萄糖苷酶的制备方法，其特征在于，步骤(2)扩增时所用引物序列分别为：
上游引物：5’-CTC
下游引物：5’-TGA
5.如权利要求2所述的β-葡萄糖苷酶的制备方法，其特征在于，步骤(2)中所用的DNA聚合酶为PrimeSTAR Max DNA Polymerase，PCR反应程序为：95℃预变性10min；98℃变性10s，55℃退火15s，72℃延伸60s，30次循环；72℃保温8min。
6.权利要求1所述β-葡萄糖苷酶用于葡萄酒酿制的应用。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于西北农林科技大学，未经西北农林科技大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201911146480.1/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
