[发明专利]PCA3和PSA RNA检测试剂盒和扩增体系

权利要求书

1.一种PCA3和PSA基因检测试剂盒，其特征是，包括有针对PCA3和PSA基因引物和荧光探针和Stoffel片段和Tfl DNA聚合酶，其中，针对PCA3基因的引物如SEQ ID NO.1和SEQ IDNO.2所示，荧光探针的序列如SEQ ID NO.3所示；针对PSA基因的引物如SEQ ID NO.10和SEQID NO.11所示，和荧光探针的序列如SEQ ID NO.12所示。

2.根据权利要求1所述的PCA3和PSA基因检测试剂盒，其特征是，还包括有针对内参ACTB基因的引物和荧光探针，所述针对内参ACTB基因的引物如SEQ ID NO.7和SEQ ID NO.8所示，荧光探针的序列如SEQ ID NO.9所示。

3.根据权利要求1所述的PCA3和PSA基因检测试剂盒，其特征是，还包括有MMLV DNA聚合酶。

4.根据权利要求3所述的PCA3和PSA基因检测试剂盒，其特征是，所述Tfl DNA聚合酶和MMLV DNA聚合酶和Stoffel片段的用量是2±0.1U：200±5U：5±0.2U。

5.根据权利要求1-4任一项所述的PCA3和PSA基因检测试剂盒，其特征是，还包括有Tris-MOPS-柠檬酸钠缓冲液。

6.一种PCA3和PSA基因实时荧光定量RT-PCR检测扩增体系，其特征是，在常规扩增buffer中添加包括权利要求1所述PCA3和PSA基因检测试剂盒中的所述引物和探针以及Stoffel片段和Tfl DNA聚合酶，MMLV DNA聚合酶，以及dNTP的试剂。

7.根据权利要求6所述的PCA3和PSA基因检测扩增体系，其特征是，所述扩增体系中，所述Tfl DNA聚合酶和MMLV DNA聚合酶和Stoffel片段的用量是2±0.1U：200±5U：5±0.2U。

8.根据权利要求6所述的PCA3和PSA基因检测扩增体系，其特征是，还包括有Tris-MOPS-柠檬酸钠缓冲液，其中，柠檬酸钠的浓度为3±0.1mM,Tris溶液浓度为66±0.5mM，MOPS溶液浓度为18±0.5mM。

9.根据权利要求6-8任一项所述的PCA3和PSA基因检测扩增体系，其特征是，所述每条引物的储存浓度为20μM，用量为0.1μL。

10.根据权利要求9所述的PCA3和PSA基因检测扩增体系，其特征是，所述每条探针的储存浓度为100μM，用量为0.1μL。