[发明专利]一种蝴蝶兰花梗茎段快速繁殖方法

说明书

本发明公开了一种蝴蝶兰花梗茎段快速繁殖方法，包括如下步骤：（1）培养基的配制；（2）外植体的制备；（3）接种；（4）接种后管理。本发明提供了一种蝴蝶兰花梗茎段快速繁殖方法，不仅有效的防止了愈伤组织褐化变质，还大大的降低了蝴蝶兰组织培养的染菌率，提高了愈伤组织分裂、分化、增殖的能力，进而提高了蝴蝶兰组织培养的繁殖率，极具市场推广价值。

技术领域

本发明属于花卉种植技术领域，具体涉及一种蝴蝶兰花梗茎段快速繁殖方法。

背景技术

蝴蝶兰（Phalaenopsis amabilis）又称蝶兰，属热带气生兰，多年生草本植物。蝴蝶兰属是著名的切花种类，是国际上最具商业价值的四大观赏热带兰之一。蝴蝶兰有“洋兰皇后”的美称，随着国内市场需求量的增加，蝴蝶兰生产前景将越来越好，具有极高的经济价值。由于蝴蝶兰属于单轴性气生兰，种子细小，胚及胚乳等发育不完全，不适合用传统方法进行播种。利用组织培养进行蝴蝶兰种苗大量繁殖是一个快速、便捷、不受时间约束的有效途径。虽然现今对蝴蝶兰组织培养的研究有很多，但是蝴蝶兰在组织培养中仍然有很多问题没有得到好的改善，在组织培养过程中，外植体容易褐化变质随后死亡，并且防止外植体诱导过程中染菌也是一个比较常见的问题，为了克服蝴蝶兰组织培养中存在的问题，本申请主要从组培的培养基，外植体制备以及接种后管理几方面着手，提高蝴蝶兰组织培养的繁殖率，提升组培苗的品质。

发明内容

本发明的目的是针对现有的问题，提供了一种蝴蝶兰花梗茎段快速繁殖方法，不仅有效的防止了愈伤组织褐化变质，还大大的降低了蝴蝶兰组织培养的染菌率，提高了愈伤组织分裂、分化、增殖的能力，进而提高了蝴蝶兰组织培养的繁殖率，极具市场推广价值。

本发明是通过以下技术方案实现的：

一种蝴蝶兰花梗茎段快速繁殖方法，包括如下步骤：

（1）培养基的配制：

a. 先称取相应重量份的冬瓜皮13.5~14.5份、西瓜皮8.5~9.5份、苋菜梗5.5~6.5份、黄瓜皮11~12份，南瓜藤13~14份共同置于木筛子上，然后在木筛子下面进行蒸汽熏蒸，熏蒸32~38min后，取出混合原料备用；

b. 将操作a中熏蒸处理后的混合原料置于深冷式粉碎机中进行粉碎处理，粉碎处理24~28min后，过50~70目筛备用；

c. 先将操作b中过筛后的粉末和无菌水按照重量体积比为1g:4.2~4.8mL共同投入微射流高压均质机内，然后进行均质处理，均质处理11~13min后，用3~5层纱布进行过滤，得滤液和滤饼备用；

d. 称取相应重量份的操作c所得滤液210~290份、柠檬酸2.2~2.8份、微量元素1.2~1.8份、6-苄基氨基嘌呤0.65~0.75份、萘乙酸0.32~0.38份、粉末添加剂3.2~3.8份、琼脂粉7.5~8.5份、纯化水510~590份备用；

e. 先将操作d中所称取的所有原料共同投入搅拌罐内，以42~48℃/min的速度将搅拌罐内的温度升至98~100℃，在升温的过程中以620~680rpm的转速进行搅拌直至原料中的琼脂粉完全融化，然后停止搅拌，将搅拌罐内的温度升至122~128℃，压力升至3.2~3.8MPa，维温维压21~23min，再降温降压，待压力降至常压，温度降至72~78℃时，取出产物趁热分装即得培养基备用；

（2）外植体的制备：

a. 先选取花朵凋谢，花期已过，生长健壮的蝴蝶兰花梗，然后将选取的花梗切成4~6cm的茎段；

b. 先将操作a中所得的蝴蝶兰花梗茎段投入杀菌液中进行浸泡，在浸泡的同时进行搅拌，浸泡处理15~19min后，用无菌水冲洗蝴蝶兰花梗茎段直至将表面的杀菌液冲洗干净，然后用无菌吸水纸将所得花梗茎段表面的无菌水吸干备用；