[发明专利]一种鉴别糙海参卵巢发育期雌参个体的方法有效
| 申请号： | 201911153121.9 | 申请日： | 2019-11-22 |
| 公开（公告）号： | CN110720413B | 公开（公告）日： | 2021-04-06 |
| 发明（设计）人： | 陈廷;任春华;胡超群;李小敏;吴菲菲;江晓 | 申请（专利权）人： | 中国科学院南海海洋研究所 |
| 主分类号： | A01K61/30 | 分类号： | A01K61/30;A01K61/90;G01N33/68;C07K14/775;C07K1/14 |
| 代理公司： | 广州科粤专利商标代理有限公司 44001 | 代理人： | 刘明星;朱聪聪 |
| 地址： | 511458 广东*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 鉴别 海参 卵巢 发育期 个体 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种鉴别糙海参卵巢发育期雌参个体的方法，其特征在于，包括以下步骤：
抽取糙海参的体腔液，然后超速离心分离出卵黄蛋白，再经SDS-PAGE电泳和染色，通过电泳结果将卵巢发育期的雌参、雄参以及性腺未发育的糙海参区别开来；
所述的通过电泳结果将卵巢发育期的雌参、雄参以及性腺未发育的糙海参区别开来是在200-250kDa处有明显条带的为卵巢发育期雌参个体，而性腺未发育个体和雄性个体均不具备特征条带，由此鉴别出糙海参卵巢发育期雌参个体；
所述的超速离心分离出卵黄蛋白是将含有浓度为1mM PMSF、密度为1.215g/mL的KBr的溶液4mL加入超速离心管底部，将1mL糙海参的体腔液加入超速离心管上部，在Himac CP100MX超速离心机，使用P100AT-0132转子，以180,000g转速、10℃离心24h，取上部300μL液体，即为包含卵黄蛋白的溶液。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的染色是考马斯亮蓝染色。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的抽取糙海参的体腔液是用预先加入蛋白酶抑制剂PMSF溶液的注射器穿过糙海参体壁，插入到达体腔，抽取体腔液。
4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述的蛋白酶抑制剂PMSF溶液是100mMPMSF的溶液。
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