[发明专利]一种稳态化矮牵牛素-3-O-葡萄糖苷衍生物及制备方法

权利要求书

1.稳态化矮牵牛素-3-O-葡萄糖苷衍生物，其特征在于，结构式如式Ⅰ所示：

2.权利要求1所述的稳态化矮牵牛素-3-O-葡萄糖苷衍生物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤一、将山葡萄去梗，打浆，得山葡萄浆液；

步骤二、采用非热提取技术提取山葡萄浆液中的花青素，得花青素溶液；

所述非热提取技术为超声提取或高压脉冲电场提取；

步骤三、将花青素溶液离心，取上清液，经减压浓缩，大孔树脂洗脱，合并洗脱液，减压浓缩，冷冻干燥，得花青素纯化物；

步骤四、用含0.5～1％(v/v)HCl的甲醇溶液溶解花青素纯化物，使用制备液相色谱分离，收集洗脱峰，冷冻干燥，得矮牵牛素-3-O-葡萄糖苷；

步骤五、将咖啡酸和矮牵牛素-3-O-葡萄糖苷按照质量比为1:(3～5)溶于有机溶剂中，混合均匀，得到混合液，使用pH为3.0的磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液稀释混合液至矮牵牛素-3-O-葡萄糖苷的浓度为0.1～0.2mg/ml；先在避光下，50～60℃水浴30～60min，然后采用超高压稳态化处理，稳定压力160～500MPa，保压时间1～15min，得到的处理液经大孔树脂柱纯化后，减压浓缩，冷冻干燥，得稳态化矮牵牛素-3-O-葡萄糖苷衍生物。

3.根据权利要求1所述的稳态化矮牵牛素-3-O-葡萄糖苷衍生物的制备方法，其特征在于，所述步骤二中，超声提取工艺为：提取溶剂为0.1％盐酸-75％乙醇溶液，液料比为7:1w/w，功率为270W，时间为15min。

4.根据权利要求1所述的稳态化矮牵牛素-3-O-葡萄糖苷衍生物的制备方法，其特征在于，所述步骤二中，高压脉冲电场提取工艺为：提取溶剂为0.1％盐酸-75％乙醇溶液，液料比为9:1w/w，电场强度为15kv/cm，脉冲数为4。

5.根据权利要求1所述的稳态化矮牵牛素-3-O-葡萄糖苷衍生物的制备方法，其特征在于，所述步骤三中，大孔树脂的型号为D101，大孔树脂洗脱的过程为：上样及洗脱速率为1.5BV/h，上样后静置30min，用5～8倍柱体积的纯化水洗脱杂质，再用0.1％HCl-75％乙醇溶液洗脱至无色；

所述步骤三中，取上清液减压浓缩至相对密度为1.1～1.2，温度为50℃；合并洗脱液减压浓缩至相对密度为1.2～1.3，温度为50℃。

6.根据权利要求1所述的稳态化矮牵牛素-3-O-葡萄糖苷衍生物的制备方法，其特征在于，所述步骤四中，制备液相色谱分离的条件为：

色谱柱：SunFire Prep C₁₈柱，尺寸为19mm×50mm，5μm；检测波长530nm；柱温25℃；流速5mL/min；进样量150μL；流动相A-5％甲酸水溶液，B-甲醇，梯度洗脱：0～5min，15％B；5～8min，15％～20％B；8～13min，10％～15％B；13～16min，25％～31％B；16～17min，31％～100％B；17～19min，100％B；19～20min，100％～15％B；20～23min，15％B。

7.根据权利要求1所述的稳态化矮牵牛素-3-O-葡萄糖苷衍生物的制备方法，其特征在于，所述步骤五中，水浴温度为55℃，水浴时间为45min。

8.根据权利要求1所述的稳态化矮牵牛素-3-O-葡萄糖苷衍生物的制备方法，其特征在于，所述步骤五中，稳定压力为200～400MPa。

9.根据权利要求1所述的稳态化矮牵牛素-3-O-葡萄糖苷衍生物的制备方法，其特征在于，所述步骤五中，减压浓缩至相对密度为1.2～1.3，温度为50℃。

10.根据权利要求1所述的稳态化矮牵牛素-3-O-葡萄糖苷衍生物的制备方法，其特征在于，所述步骤五中，有机溶剂为无水乙醇；缓冲液为磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液或醋酸-醋酸钠缓冲液。