[发明专利]一种多功能融合酶XAET和多功能融合酶定点整合真核特异表达载体及其构建方法有效
| 申请号： | 201911170220.8 | 申请日： | 2019-11-26 |
| 公开（公告）号： | CN110846336B | 公开（公告）日： | 2022-12-20 |
| 发明（设计）人： | 吴珍芳;张献伟;莫健新;李国玲;王豪强;阮晓芳;钟翠丽;孙悦;蔡更元;杨化强 | 申请（专利权）人： | 温氏食品集团股份有限公司;华南农业大学 |
| 主分类号： | C12N15/62 | 分类号： | C12N15/62;C12N9/42;C12N9/24;C12N9/16;C12N15/85;A01K67/027 |
| 代理公司： | 北京中普鸿儒知识产权代理有限公司 11822 | 代理人： | 曲芳兵 |
| 地址： | 527300 广东*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 多功能 融合 xaet 定点 整合 特异 表达 载体 及其 构建 方法 | ||
1.一种多功能融合酶XAET，其特征在于，所述的多功能融合酶基因由木聚糖酶基因-A3-植酸酶基因-furin-P2A-纤维素酶基因-A3'-纤维素酶基因组成，所述的多功能融合酶XAET氨基酸序列如SEQ ID No:12所示。
2.一种多功能融合酶XAET基因，其特征在于，所述的多功能融合酶XAET基因序列如SEQID No:11所示。
3.一种多功能融合酶定点整合真核特异表达载体，其特征在于，所述的载体包含如权利要求1中所述的多功能融合酶XAET。
4.根据权利要求3所述的多功能融合酶定点整合真核特异表达载体，其特征在于，所述的载体基因序列如SEQ ID No:13所示。
5.包含权利要求1中所述多功能融合酶XAET的定点整合真核特异表达载体的构建方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：
候选目的基因的筛选和优化；
连接肽的设计；
目的基因与连接肽连接；
多功能融合酶基因XAET的合成；
构建CEP112位点定点转XAET基因表达载体。
6.根据权利要求5所述的定点整合真核特异表达载体的构建方法，其特征在于，所述的构建CEP112位点定点转XAET基因表达载体包括如下步骤：
将XAET多顺反子替换CEP112-LA340RA3219载体中BEXA顺反子，构建新载体Cep112-mPSP-XAET；
用PacI和sexAI线性化Cep112-mPSP-XAET，然后用inf-npsp引物扩增npsp上游调控区，并替换现有mpsp序列；
构建CEP112位点定点转XAET基因表达载体Cep112-npsp-XAET。
7.权利要求1 中所述多功能融合酶XAET的应用，其特征在于，所述的多功能融合酶XAET用于制备节粮环保转基因动物。
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