[发明专利]一种提高细胞脂质体转染效率的方法

权利要求书

1.一种提细胞高脂质体转染效率的方法，其特征在于包含如下步骤：

1)将包含细胞的液体培养基接种于转染容器中，所述包含细胞的液体培养基中包含乙草胺0.01-1μM，氯化钙0.1-50μM，胆固醇.0.1-3μM；

2)：向所述转染容器中添加转染DNA和脂质体转染试剂的混合液进行转染。

2.根据权利要求1所述步骤1)中液体培养基含有乙草胺、氯化钙或者胆固醇中的一种或一种以上物质。

3.根据权利要求1或2所述步骤1)中液体培养基含有的的最佳浓度为乙草胺浓度0.03μM、氯化钙25μM、胆固醇0.5μM。

4.根据权利要求1所述步骤2)具体包括：

a)：将所述转染DNA与脂质体转染试剂混匀，于室温下静置20分钟，得到转染DNA与脂质体转染试剂的混合液；

b)：将所述转染DNA与脂质体转染试剂的混合液加入到装有包含细胞的液体培养基的转染孔中，混匀；

c)：细胞于37℃下培养12-18小时；

d)：更换新鲜的含10％胎牛血清的DMEM高糖培养基培养基，即得到转染好的细胞。

5.根据权利要求1所述步骤2)中转染D N A为质粒D N A，脂质体转染试剂为Lipofectamine2000、TransLipid HL。