[发明专利]一种活性寡肽的制备方法有效
申请号: | 201911178816.2 | 申请日: | 2019-11-27 |
公开(公告)号: | CN110804637B | 公开(公告)日: | 2021-09-10 |
发明(设计)人: | 王静;杨桂兰;耿凤;魏健;郭学平;刘爱华 | 申请(专利权)人: | 华熙生物科技股份有限公司;山东华熙海御生物医药有限公司 |
主分类号: | C12P21/06 | 分类号: | C12P21/06;C07K1/34;A23L33/18;A61K8/64;A61Q19/08 |
代理公司: | 济南泉城专利商标事务所 37218 | 代理人: | 安丽艳 |
地址: | 250101 山东省济*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 活性 寡肽 制备 方法 | ||
1.一种寡肽的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)将蛋白质溶液与复合蛋白酶I混合后在酶解反应器中预酶解,获得预酶解液;
(2)首次过滤:将预酶解液泵入超滤设备1,酶解一段时间后开启超滤设备1,获得透过液1;
透过液1进入超滤设备2至一定量,加入复合蛋白酶II,酶解一段时间后开启超滤设备2,获得透过液2;
透过液2进入纳滤设备进行纳滤,获得透过液3和流出液,收集流出液,流出液即含寡肽的溶液,透过液3流回至超滤设备1;
(3)重复循环:超滤设备1开启后持续补充蛋白质溶液的溶剂,持续获得透过液1;透过液1持续进入超滤设备2,持续获得透过液2;透过液2持续进入纳滤设备,持续获得透过液3和流出液;
(4)流出液中寡肽浓度小于设定阈值时,超滤设备1中再次泵入预酶解液;
所述蛋白质来源为大米;
所述复合蛋白酶I包括碱性蛋白酶、胰蛋白酶和中性蛋白酶;其用量分别为1000-2000U/g蛋白、1500-2500 U/g蛋白和1500-2500 U/g蛋白;
所述复合蛋白酶II包括木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和端肽酶;其用量分别是1000-2000U/g蛋白、1000-2000 U/g蛋白和500-1500 U/g蛋白;
步骤(1)中,预酶解的条件为:40-60℃,20-60min;
步骤(2)中,超滤设备1中酶解的条件为:40-60℃,10-30min;超滤设备2中酶解的条件为:40-60℃,5-20min;
步骤(2)中,超滤设备1的超滤膜截留分子量为4000-6000Da;超滤设备2的超滤膜截留分子量为1500-2500Da;纳滤膜截留分子量200Da;
步骤(4)中,所述阈值为0.1mg/mL。
2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤(1)中,所述蛋白质溶液的浓度为5-15mg/mL。
3.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤(1)中,所述蛋白质溶液的pH为6-9;
所述蛋白质溶液的溶剂选自NaOH溶液、Britton-Robinson广泛缓冲溶液、PB缓冲溶液、PBS缓冲溶液。
4.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤(2)中,所述超滤膜选自切向流板式膜、卷式膜或中空纤维膜;所述超滤膜的材料选自再生纤维素膜或聚砜膜。
5.根据权利要求4所述的制备方法,其特征在于,步骤(2)中,所述超滤膜为切向流板式膜;所述超滤膜的材料为再生纤维素膜。
6.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤(4)后还包括将流出液浓缩或干燥获得产品的步骤。
7.一种如权利要求1-6任一所述制备方法获得的寡肽。
8.一种含如权利要求7所述寡肽的化妆品或保健食品。
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