[发明专利]和肽素化学发光免疫检测试剂盒及其制备方法

说明书

本发明提供一种和肽素化学发光免疫检测试剂盒及其制备方法，属于试剂盒技术领域。该试剂盒包括：链霉亲和素带有Tosyl官能团的磁颗粒R1；化学发光标记物标记的和肽素抗体R2；偶联和肽素衍生物R3。本发明还提供一种和肽素化学发光免疫检测试剂盒的制备方法。本发明的试剂盒能够以全自动化学发光免疫分析仪为检测工具，减少人为操作误差，并且实现无人值守，完成对和肽素的检测。这种化学发光免疫分析试剂盒与仪器配套，缩短了临床检测所需的时间。

技术领域

本发明属于试剂盒技术领域，涉及一种和肽素化学发光免疫检测试剂盒及其制备方法。

背景技术

心力衰竭是各种心脏结构或功能性疾病所导致心脏充盈或射血能力受损引起的临床综合征，是各种心脏疾病的终末期表现，致死率仅次于肿瘤。和肽素 (Copeptin)于1972年由Holwerda首次发现，其由39个氨基端残基组成，分子量约为5KDa。和肽素、神经垂体素运载蛋白II(Neurophysin II)及精氨酸加压素(AVP)共同组成加压素原。和肽素位于加压素原的氨基末端，与AVP由神经垂体等摩尔释放于血液中。AVP水平在急性冠脉综合征和心衰患者血液中升高，可以反映疾病的严重程度及预后评估。但AVP在体外测定比较困难，因此和肽素就称为AVP的良好替代物。

和肽素作为一种内源应激标记物，参与机体的应激反应，在急性冠脉综合征发生的最初就有显著升高，因此有望成为急性心肌梗死的诊断与排除的标志物之一；同时，和肽素可作为心力衰竭的标志物，在体内表达水平与患者心衰的程度密切相关，对指导诊疗和评估预后有重要作用。

目前测定和肽素的方法有放射免疫分析(RIA)和酶联免疫分析(ELISA) 法。两种方法在实际应用过程中都存在一定的弊端：RIA的放射性核素污染、标记物的货价期短、操作复杂、测试结果不稳定；ELISA法灵敏度不高，操作复杂，检测时间长，自动化程度低化学发光免疫分析法具有灵敏度高、准确定量、无放射性风险及其检测时间短，并且可以对衍生物、抗体类目标物质进行检测。

和肽素化学发光免疫测试剂盒相比传统的检测方法，衍生物、抗体的结合是在相似的液体条件下进行，反应更加迅速灵敏；另一方面，和肽素化学发光免疫测试剂盒与化学发光免疫检测仪器组成封闭系统，试剂、样本的添加及检测任务均由仪器自动完成，降低了人为操作的误差，提高了整个系统的灵敏度与准确度。

发明内容

本发明的目的是提供一种和肽素化学发光免疫检测试剂盒及其制备方法，该试剂盒的检测精度较高。

本发明首先提供一种和肽素化学发光免疫检测试剂盒，该试剂盒包括：

链霉亲和素带有Tosyl官能团的磁颗粒R1；化学发光标记物标记的和肽素抗体R2；偶联和肽素衍生物R3。

优选的是，所述的链霉亲和素带有Tosyl官能团的磁颗粒的粒径是3～6μm。

优选的是，所述化学发光标记物标记的抗体中，和肽素抗体与化学发光标记物的标记摩尔比例是1:3～10，缓冲液为100～500mM BISTRIS丙烷， 0.05％～0.1％PC300及0.05％～0.1％吐温-20,抗体终浓度为0.1～2μg/mL。

优选的是，所述化学发光标记物为吖啶酯、鲁米诺、异鲁米诺和三联吡啶钌。

优选的是，所述偶联标记的和肽素衍生物中，和肽素衍生物与偶联标记物的标记摩尔比例是1:5～10，缓冲液为缓冲液为100～500mM BISTRIS丙烷， 0.05％～0.1％PC300及0.05％～0.1％吐温-20，抗体终浓度为0.2～3μg/mL。

优选的是，所述偶联标记物为生物素或生物素衍生物。

优选的是，所述的试剂盒还包括化学发光底物液，所述化学发光底物液包括A液和B液；

其中所述化学发光底物液A为硝酸和过氧化氢溶液，B为氢氧化钠溶液。