[发明专利]一种高产γ-氨基丁酸的乳杆菌及其分离培养方法和应用

权利要求书

1.一种高产γ-氨基丁酸的乳杆菌，其特征在于，所述高产γ-氨基丁酸的乳杆菌命名为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)D-9菌株，保藏单位为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏时间为2018年12月4日，保藏编号为CGMCC No.16864，地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号。

2.如权利要求1所述的高产γ-氨基丁酸的乳杆菌的分离培养方法，其特征在于，所述分离培养方法包括：

(1)从传统发酵腌制品进行初步分离，筛选出能使溴甲酚紫-MRS平板变黄的菌落；

(2)挑取步骤(1)获得的能使溴甲酚紫-MRS平板变黄的菌落，进行重复划线培养，获得纯种菌落，并筛选出具有革兰氏染色阳性和过氧化氢酶试验阴性的菌株；

(3)将步骤(2)筛选出的菌株经过产γ-氨基丁酸的初筛和复筛，获得所述高产γ-氨基丁酸的乳杆菌。

3.如权利要求2所述的高产γ-氨基丁酸的乳杆菌的分离培养方法，其特征在于，步骤(1)的操作具体包括：将传统发酵腌制品用无菌生理盐水稀释后，涂布于溴甲酚紫-MRS培养基平板上，于35-40℃恒温培养48-72h。

4.如权利要求2或3所述的高产γ-氨基丁酸的乳杆菌的分离培养方法，其特征在于，步骤(3)所述将筛选出的菌株经过产γ-氨基丁酸的初筛是指采用薄层层析法进行初筛；

优选地，步骤(3)所述将筛选出的菌株经过产γ-氨基丁酸的复筛是指采用高效液相色谱法进行复筛。

5.如权利要求1所述的高产γ-氨基丁酸的乳杆菌在制备红薯发酵饮料中的应用。

6.一种红薯发酵饮料的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括如下步骤：

(1)将红薯与水混合后进行打浆，得到红薯浆；

(2)将步骤(1)得到的红薯浆与糖类物质混合；

(3)将步骤(2)得到的产物进行灭菌处理；

(4)将复合菌剂接种于步骤(3)得到的产物中，进行发酵，得到所述红薯发酵饮料；所述复合菌剂为保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌和如权利要求1所述高产γ-氨基丁酸的乳杆菌的组合。

7.如权利要求6所述的红薯发酵饮料的制备方法，其特征在于，步骤(1)所述红薯与水的质量比为1:(1-3)，优选1:2；

优选地，步骤(2)所述糖类物质在红薯浆中的质量体积百分含量为2-10％，优选4-8％；

优选地，步骤(2)所述糖类物质包括白砂糖。

8.如权利要求6或7所述的红薯发酵饮料的制备方法，其特征在于，步骤(4)所述保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌和如权利要求1所述高产γ-氨基丁酸的乳杆菌的质量比为1:(1-3):(1-3)，优选1:1:(1-3)，进一步优选为1:1:1；

优选地，步骤(4)所述复合菌剂的接种量为3×10⁶CFU/mL-3×10⁹CFU/mL；

优选地，步骤(4)所述发酵的时间为6-8h；

优选地，步骤(4)所述发酵的温度为30-39℃。

9.如权利要求6-8中任一项所述的红薯发酵饮料的制备方法，其特征在于，所述制备方法具体包括如下步骤：

(1)将新鲜的红薯清洗、去皮、切块，蒸制15-20min；

(2)将步骤(1)中蒸制后的红薯与水以质量比为1:(1-5)进行混合后打浆，得到红薯浆；

(3)将步骤(2)得到的红薯浆与白砂糖混合，使白砂糖在红薯浆中的质量体积百分含量为2-10％；

(4)将步骤(3)得到的产物在80-100℃的水浴锅中灭菌10-15min；

(5)将保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌和如权利要求1所述高产γ-氨基丁酸的乳杆菌以质量比为1:(1-3):(1-3)接种于步骤(4)得到的产物中，接种量为3×10⁶CFU/mL-3×10⁹CFU/mL，在30-39℃下发酵6-8h，得到所述红薯发酵饮料。

10.如权利要求6-9中任一项所述的制备方法制备得到的红薯发酵饮料。