[发明专利]一种用于口腔扁平苔藓癌前病变的检测装置

说明书

本发明涉及一种用于口腔扁平苔藓癌前病变的检测装置，包括Golli‑MPB、STIM1、FGF19、FGFR4四种蛋白标记物和以所述四种标记物作为检测靶标的试剂盒，根据所述四种标记物的mRNA的表达量判断扁平苔藓癌前病变的发展阶段，所述试剂盒包括荧光定量PCR试剂、Western‑blot蛋白印迹、逆转录试剂和DAB显色试剂，本发明提供的检测装置，可以有效预测口腔扁平苔藓癌前病变风险。

技术领域

本发明属于生物技术及诊断技术领域，具体涉及一种用于口腔扁平苔藓癌前病变的检测装置。

背景技术

口腔扁平苔藓(orallichenplanus，OLP)是一种常见的口腔黏膜疾病，病因不明，易反复发作，有一定的癌变倾向，被世界卫生组织定义为癌前状态。口腔扁平苔薛发病机制尚不明确，目前研究表明，可能与免疫、精神、内分泌、感染、微循环障碍、遗传、系统性疾病及口腔局部刺激因素等有关，其中细胞介导的局部免疫应答紊乱在的发生发展中有重要作用，临床上使用糖皮质激素及氯喹等免疫抑制剂治疗有效，也证明本病与免疫因素有关。的典型病理表现为上皮过度不全角化，基底层液化变性以及固有层有密集的淋巴细胞呈带状浸润。口腔扁平苔藓是淋巴细胞介导的慢性炎症，淋巴细胞为主的选择性聚集以造成基底细胞的过度调亡。角质形成细胞和炎症浸润细胞产生细胞因子，促使淋巴细胞从血循环迁移到上皮下炎症浸润区。

癌症几乎总是由专家在显微镜下观察细胞或组织样品来诊断，在一些情况下，对细胞的蛋白质、DNA和RNA进行的测试可以帮助告诉医生是否存在癌症，这些测试结果在选择最佳治疗选项时是重要的，这些测试通常在个体有疾患自己挂号时进行，在这些情况下，如果是癌症，则很可能癌症已经进展到简单手术不能治愈或转移可能性显著的程度，导致需要使用化学疗法和/或放射进行侵入性治疗以及总体预后不良。另一方面，当疾患不是由癌症引起时，患者在等待活组织检查结果的相当长时间内处于不确定状态。

因此，需要一种简单、快速且非侵入性的方法来确定个体是否具有癌症，并且如果是癌症，则确定它是什么类型的癌症。

发明内容

本发明的目的是为了解决背景技术中所提出的问题，而提供一种用于快速、可靠的口腔扁平苔藓癌前病变的检测装置。

本发明的目的是这样实现的：

一种用于口腔扁平苔藓癌前病变的检测装置，包括Golli-MPB、STIM1、FGF19、FGFR4四种蛋白标记物和以所述四种标记物作为检测靶标的试剂盒，根据所述四种标记物的mRNA的表达量判断扁平苔藓癌前病变的发展阶段，所述试剂盒包括荧光定量PCR试剂、Western-blot蛋白印迹、逆转录试剂和DAB显色试剂。

进一步的，所述荧光定量PCR试剂、Western-blot蛋白印迹和逆转录试剂检测Golli-MPB和STIM1两种蛋白，所述DAB显色试剂检测FGF19和FGFR4两种蛋白。

进一步的，所述Western-blot蛋白印迹包括细胞裂解液，蛋白酶抑制剂，SDS-PEGA凝胶试剂盒，PVDA，兔源抗STIM1单克隆抗体，辣根过氧化物酶(HRP)标记山羊抗鼠IgG。

进一步的，所述Golli-MPB和STIM1两种蛋白的检测包括如下步骤：

S1、样本总RNA提取，将口腔扁平苔藓组织纯化为外周血淋巴细胞，经离心、干燥、溶解后进行逆转录；

S2、总RNA浓度和纯度检测，通过紫外分光光度计测定S1中样品的RNA浓度和纯度；

S3、将总RNA逆转录为cDNA，通过逆转录试剂盒调制反应液，冷却后在-20℃下贮存cDNA；

S4、实时定量PCR，根据Golli-MPB和STIM1基因序列设计引物，扩增后通过荧光定量PCR仪检测基因表达量；