[发明专利]一种HPLC法分离测定盐酸左西替利嗪及其基因毒性杂质E的方法

说明书

本发明属于分析化学领域，具体涉及一种HPLC法分离测定盐酸左西替利嗪及其基因毒性杂质E的方法。该方法中采用的色谱柱是以十八烷基键合硅胶为填料，采用磷酸二氢钾和甲醇和/或乙腈的混合流动相进行洗脱，进入检测器进行检测。该方法为反相高效液相色谱法，可同时实现盐酸左西替利嗪及其基因毒性杂质E的分离和检测，且有优良的分离性能和耐久性，简便可行，重现性好，高效快速，拖尾因子和理论踏板数均能达到非常好的效果，可以有效测定盐酸左西替利嗪中基因毒性杂质E的含量，专属性强。

技术领域

本发明属于分析化学领域，具体涉及一种HPLC法分离测定盐酸左西替利嗪及其基因毒性杂质E的方法。

背景技术

盐酸左西替利嗪(Levocetirizine Hydrochloride)于2001年2月上市，为第三代抗组胺药，是第二代抗组胺药西替利嗪的单一光学异构体(西替利嗪TP-异构体)，由UCB公司研发，为选择性组胺Hl受体拮抗剂，无明显抗胆碱和抗5-羟色胺的作用，中枢抑制作用较小，主要用于治疗呼吸系统、皮肤和眼睛等处的过敏性疾病，如过敏性鼻结膜炎、过敏性皮肤病、过敏性哮喘等，具有作用起效快、效应强而持久和副作用少的优点。

盐酸左西替利嗪适用人群广泛，可用于儿童与妊娠期和哺乳期妇女，安全、可靠、临床效果显著。盐酸左西替利嗪化学名R-2-[2-[4-[(4-氯苯基)苯基甲基]-1-哌嗪基]乙氧基]乙酸，二盐酸盐，分子式为C21H25ClN2O3·2HCl，结构式如下式I：

基因毒性杂质E的化学名称为2-(2-氯乙氧基)乙酸，结构式如下式II：

药物合成和制剂过程中需要对盐酸左西替利嗪中基因毒性杂质E含量进行严格控制。而基因毒性的分析、分离一直是药物合成和制剂过程中质量控制的难点和重点，实现盐酸左西替利嗪中基因毒性杂质E的分离在盐酸左西替利嗪药物合成和制剂过程的质量控制方面具有非常重要的社会意义和经济效益。

对于制备盐酸左西替利嗪过程中产生的基因毒性杂质E，不论是在原料药还是制剂中均需要进行严格控制。目前没有相关检测方法的公开报道。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的之一在于提供一种从盐酸左西替利嗪原料中分离基因毒性杂质E的方法，该方法操作简单，分离度大。

所述盐酸左西替利嗪的结构式如式I:

基因毒性杂质E的化学名称为2-(2-氯乙氧基)乙酸，结构式如式II:

用填充有十八烷基键合硅胶的高效液相色谱柱作为固定相，以磷酸二氢钾缓冲盐、甲醇或/和乙腈的混合溶液作为流动相将基因毒性杂质E分离。

进一步，所述磷酸二氢钾缓冲盐和所述甲醇或/和乙腈的体积比为90-95:5-10，所述磷酸二氢钾缓冲盐的浓度为0.01mol/L-0.03mol/L，所述流动相的pH值为2-4。

进一步，影响药物杂质分离的因素很多，在确定的固定相条件下，对确定的样品来说，流动相的组成是影响分离的关键因素。磷酸二氢钾浓度高了，与甲醇混合容易析出固体，浓度低了达不到离子对试剂效果，优选浓度为0.02mol/L。

进一步，所述流动相体系的pH为2-4。流动相的pH和离子强度对十八烷基键合硅胶键合相的选择性和效能有很大的影响，在流动相中加入盐，形成缓冲溶液，对保留和效能的影响比对选择性的影响大，由于缓冲剂与分析物竞争占领十八烷基键合硅胶空腔，所以随缓冲剂的强度增加，溶质的保留降低，效能增加。流动相pH的变化对离解溶质的有很大的影响，优选pH为3。

进一步，所述流动相的流速为0.8-1.2ml/min。