[发明专利]非洲猪瘟病毒P30蛋白的单克隆抗体及其应用

权利要求书

1.一种特异性结合非洲猪瘟病毒P30蛋白的抗体或抗体片段，其特征在于，所述抗体或抗体片段的重链可变区为SEQ. ID No.1所示序列编码的氨基酸序列；以及所述抗体或抗体片段的轻链可变区为SEQ. ID No.2所示序列编码的氨基酸序列。

2.根据权利要求1所述抗体或抗体片段，其特征在于，所述抗体或抗体片段为单克隆抗体、基因工程抗体；其中，所述基因工程抗体包括单链抗体、嵌合单克隆抗体；所述抗体或抗体片段仍保持特异性结合非洲猪瘟病毒P30蛋白的能力。

3.根据权利要求1所述抗体或抗体片段，其特征在于，所述抗体或抗体片段为单克隆抗体或单链抗体。

4.一种特异性结合非洲猪瘟病毒P30蛋白的抗体或抗体片段，其中，所述抗体或抗体片段的重链可变区为SEQ. ID No.3所示序列编码的氨基酸序列；以及所述抗体或抗体片段的轻链可变区为SEQ. ID No.4所示序列编码的氨基酸序列。

5.根据权利要求4所述抗体或抗体片段，其特征在于，所述抗体或抗体片段为单克隆抗体、基因工程抗体；其中，所述基因工程抗体包括单链抗体、嵌合单克隆抗体；所述抗体或抗体片段仍保持特异性结合非洲猪瘟病毒P30蛋白的能力。

6.根据权利要求4所述抗体或抗体片段，其特征在于，所述抗体或抗体片段为单克隆抗体或单链抗体。

7.一种用于检测非洲猪瘟病毒的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括有效量的权利要求3所述的单克隆抗体以及有效量的权利要求6所述的单克隆抗体；以及对非洲猪瘟病毒抗原抗体反应进行检测的检测试剂；

所述试剂盒为ELISA检测试剂盒，所述ELISA检测试剂盒包括包被有权利要求3所述的单克隆抗体的包被板、酶标权利要求6所述的单克隆抗体、样品稀释液、20×浓缩洗涤液、阳性对照、阴性对照、显色液、终止液；

权利要求3所述的单克隆抗体包被量为0.25μg/ml～8μg/ml、100μl/孔，所述酶标权利要求6所述的单克隆抗体为0.09μg/ml～1.38μg/ml、50μl/孔。

8.根据权利要求7所述试剂盒，其特征在于，权利要求3所述的单克隆抗体包被量为0.5μg/ml～4μg/ml、100μl/孔，所述酶标权利要求6所述的单克隆抗体为0.17μg/ml～1.38μg/ml、50μl/孔；

所述酶标权利要求6所述的单克隆抗体标记的酶为辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶或β-D-半乳糖甘酶；

所述阳性对照为ASFV P30蛋白的稀释液，为10μg/ml；所述阴性对照为ASFV抗原阴性的健康猪血清的稀释液，稀释100倍；所述20×浓缩洗涤液为含10%V/V的吐温20的样品稀释液；所述显色液为A、B液，A液为含磷酸氢二钠、柠檬酸、过氧化脲的溶液，B液为含四甲基联苯二胺、无水乙醇的溶液；所述终止液为2M H₂SO₄溶液；

所述样品稀释液为含蔗糖、EDTA、AM染料的PBS溶液；

所述试剂盒还包括用于封闭权利要求3所述的单克隆抗体的封闭液，所述封闭液为含Tween-20的PBS溶液。

9.根据权利要求8所述试剂盒，其特征在于，权利要求3所述的单克隆抗体包被量为1μg/ml、100μl/孔，所述酶标权利要求6所述的单克隆抗体为0.34μg/ml、50μl/孔；

所述样品稀释液为含0.5%-2%W/V蔗糖、1%W/V EDTA、0.004%m/V AM染料的pH7.4的0.1MPBS溶液；

所述封闭液为包含0.4%～2.0%W/V大豆蛋白、0.5%-2%W/V蔗糖、0.05% V/V Tween-20的pH7.4的0.1M PBS溶液。