[发明专利]果香型酵母、筛选方法及在香烟中的应用

说明书

本发明公开了一种果香型酵母、筛选方法及在香烟中的应用。本发明所述的一种果香型酵母的筛选方法，包括以下步骤：(1)在不同海拔烟草种植区的多个地点，分别取样；(2)称取烟草样品，剪碎后分别放于培养基中，振荡培养，将培养液进行梯度稀释，分别涂布于平板，置于培养箱中培养，挑取生长的单菌落接种到平板；(3)将步骤(2)在平板上培养的单菌落接种于液体培养基，振荡培养；(4)采用嗅香的方式进行感官评价，香味品质越好筛选最佳的果香型酵母。R59菌株产香发酵液过滤后均匀喷洒在烟丝表面，制成卷烟后进行感官综合评价，发酵样品的果香气更浓更饱满，香气的协调性也有增加，余味更干净，能够显著提高抽吸品质。

技术领域

本发明属于微生物及发酵领域，特别涉及一种果香型酵母、筛选方法及在香烟中的应用。

背景技术

烤烟品质对烟草行业的发展有重要影响，烟叶香气不足一直是制约烟叶品质及其工业可用性的主要因素，特别是随着降焦工艺的发展，烟气中香气会进一步降低，致使卷烟品质下降，吸食者的接受度降低，因而对烟叶的香气品质提出了更高的要求。目前改善烟叶香气品质的措施主要集中在品种选育、改善栽培技术和卷烟加工中加香加料等措施。起始阶段，香料来源主要是化学合成。化学法在成本上有优势，但是合成过程中会接触对人体危害较大的物质，并且产生环境污染。因此，开发新的香料来源逐渐成为趋势。

多种微生物发酵已被证实能产生香气物质。其中酵母菌对人体的健康无害，利用酵母菌产香已经在酿酒和食品等领域广泛应用。另外，微生物遗传变异度大，产生的香气物质多种多样，给人丰富的嗅香体验。东方伊萨酵母能够合成特殊的酯类物质，产生蟠桃香；毕赤酵母高产乙酸乙酯，也用于增加果香；球拟酵母能产生浓郁的酱香。酿酒酵母和毕赤酵母混合发酵增加花香果香，尤其热带水果香气。马克斯克鲁维酵母能产生高达400mg/L的苯乙醇，苯乙醇具有典型的玫瑰香型香气的重要成分，是构建香烟香型的重要成分，并且具有增强香气的作用。香气种类丰富的酵母发酵为烟草行业提供了切实可行的另一种香料来源。

发明内容

发明目的：为了解决现有技术的问题，本发明提供了一种果香型酵母、筛选方法及在香烟中的应用。本发明利用酵母菌筛选并测定关键致香成分，优化发酵产香条件，并评价发酵产物在香烟增香中的应用效果，旨在丰富烟草行业新颖香气物质的来源，开发具有良好风味的新型香烟。

技术方案：本发明第一方面提供了一种果香型酵母的筛选方法，包括以下步骤：

(1)在不同海拔烟草种植区的多个地点，上部叶、中部叶、下部叶分别取样；

(2)称取烟草样品，剪碎后分别放于YPD培养基或牛肉膏蛋白胨培养基中，振荡培养，将培养液进行梯度稀释，分别涂布于YPD平板和牛肉膏蛋白胨平板，置于培养箱中培养，挑取生长的单菌落接种到平板；

(3)将步骤(2)在平板上培养的单菌落接种于液体培养基，振荡培养；

(4)采用嗅香的方式进行感官评价，根据香味品质筛选最佳的果香型酵母。

步骤(2)中，所述的振荡培养条件为25-28℃下振荡培养2-3d。

步骤(3)中，所述的梯度稀释倍数为10⁴-10⁶。

本发明第二方面提供了上述的果香型酵母的筛选方法得到的果香型酵母。

本发明第三方面提供了一种果香型酵母的发酵培养基，包括20-30g/L葡萄糖，15-35g/L玉米浆粉，所述培养基的pH为5.0-6.0。

本发明第四方面提供了一种果香型酵母在香烟中的应用。

本发明第五方面提供了所述果香型酵母在香烟中的应用方法，包括以下步骤：

(a)一级培养：将YPD平板培养的酵母接种于YPD液体培养基中，在25-28℃和160-200rpm下振荡培养24-36h；