[发明专利]抗A型口蹄疫病毒单克隆抗体及其应用有效
申请号: | 201911203052.8 | 申请日: | 2019-11-29 |
公开(公告)号: | CN112876560B | 公开(公告)日: | 2022-09-23 |
发明(设计)人: | 田克恭;燕贺 | 申请(专利权)人: | 洛阳普泰生物技术有限公司 |
主分类号: | C07K16/10 | 分类号: | C07K16/10;C12N5/20;G01N33/569;G01N33/543;G01N33/577 |
代理公司: | 北京华夏正合知识产权代理事务所(普通合伙) 11017 | 代理人: | 韩登营 |
地址: | 471003 河南省洛阳市中国(*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 口蹄疫病毒 单克隆抗体 及其 应用 | ||
1.一种特异性结合A型口蹄疫病毒的单克隆抗体2E11,其中,所述单克隆抗体2E11的可变区序列包括重链可变区和轻链可变区;所述单克隆抗体2E11重链可变区的编码基因如SEQ.ID No.1或其简并序列所示;所述单克隆抗体2E11轻链可变区的编码基因如SEQ.IDNo.2或其简并序列所示。
2.一种特异性结合A型口蹄疫病毒的抗体,其中,所述抗体具有权利要求1所述单克隆抗体2E11的可变区序列,所述抗体为单克隆抗体或单链抗体。
3.一种特异性结合A型口蹄疫病毒的单克隆抗体3B4,其中,所述单克隆抗体3B4的可变区序列包括重链可变区和轻链可变区;所述单克隆抗体3B4重链可变区的编码基因如SEQ.ID No.3或其简并序列所示;所述单克隆抗体3B4轻链可变区的编码基因如SEQ.IDNo.4或其简并序列所示。
4.一种特异性结合A型口蹄疫病毒的抗体,其中,所述抗体具有权利要求3所述单克隆抗体3B4的可变区序列,所述抗体为单克隆抗体或单链抗体。
5.一种A型口蹄疫病毒固相竞争ELISA检测试剂盒,其中,所述试剂盒包括有效量的权利要求1所述单克隆抗体2E11、有效量的A型口蹄疫病毒抗原、有效量的酶标记的权利要求3所述单克隆抗体3B4,对A型口蹄疫病毒抗原抗体反应进行检测的检测试剂,支持介质,所述单克隆抗体2E11包被在支持介质上。
6.根据权利要求5所述的检测试剂盒,其中,所述单克隆抗体2E11含量为6~15μg/ml,所述A型口蹄疫病毒抗原含量为50~400μg/ml,所述单克隆抗体3B4含量为10~18μg/ml,所述支持介质为微滴定板。
7.根据权利要求6所述的检测试剂盒,其中,所述单克隆抗体2E11含量为10μg/ml,所述A型口蹄疫病毒抗原含量为200μg/ml,所述单克隆抗体3B4含量为12μg/ml。
8.根据权利要求5所述的检测试剂盒,其中,所述试剂盒还包括样品稀释液、洗涤液、显色液、终止液、阳性猪血清对照以及阴性猪血清对照;所述样品稀释液为含有脱脂奶的磷酸盐缓冲液,所述洗涤液为含有Tween-20的磷酸盐缓冲液,所述磷酸盐缓冲液,pH值为7.4,其1L体积配方为:NaCl 8.0g、KCl 0.2g、Na2HPO4·12H2O 2.9g、KH2PO40.24g;所述显色液包括显色液A和显色液B,所述显色液A含TMB 20mg、无水乙醇10ml,并用ddH2O定容至100ml;所述显色液B含柠檬酸2.1g、无水Na2HPO4 2.82g、0.75%(V/V)的过氧化氢尿素0.64ml,并用ddH2O定容至100ml;所述终止液为2mol/L H2SO4。
9.根据权利要求8所述的检测试剂盒,其中,所述样品稀释液为含有10%(W/V)脱脂奶的磷酸盐缓冲液,所述洗涤液为含有0.05%(V/V)Tween-20的磷酸盐缓冲液;所述阳性对照为A型口蹄疫病毒抗原的高免血清,所述阴性对照为无口蹄疫抗体的猪血清。
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