[发明专利]抗A型口蹄疫病毒单克隆抗体及其应用有效

专利信息
申请号: 201911203052.8 申请日: 2019-11-29
公开(公告)号: CN112876560B 公开(公告)日: 2022-09-23
发明(设计)人: 田克恭;燕贺 申请(专利权)人: 洛阳普泰生物技术有限公司
主分类号: C07K16/10 分类号: C07K16/10;C12N5/20;G01N33/569;G01N33/543;G01N33/577
代理公司: 北京华夏正合知识产权代理事务所(普通合伙) 11017 代理人: 韩登营
地址: 471003 河南省洛阳市中国(*** 国省代码: 河南;41
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摘要:
搜索关键词: 口蹄疫病毒 单克隆抗体 及其 应用
【权利要求书】:

1.一种特异性结合A型口蹄疫病毒的单克隆抗体2E11,其中,所述单克隆抗体2E11的可变区序列包括重链可变区和轻链可变区;所述单克隆抗体2E11重链可变区的编码基因如SEQ.ID No.1或其简并序列所示;所述单克隆抗体2E11轻链可变区的编码基因如SEQ.IDNo.2或其简并序列所示。

2.一种特异性结合A型口蹄疫病毒的抗体,其中,所述抗体具有权利要求1所述单克隆抗体2E11的可变区序列,所述抗体为单克隆抗体或单链抗体。

3.一种特异性结合A型口蹄疫病毒的单克隆抗体3B4,其中,所述单克隆抗体3B4的可变区序列包括重链可变区和轻链可变区;所述单克隆抗体3B4重链可变区的编码基因如SEQ.ID No.3或其简并序列所示;所述单克隆抗体3B4轻链可变区的编码基因如SEQ.IDNo.4或其简并序列所示。

4.一种特异性结合A型口蹄疫病毒的抗体,其中,所述抗体具有权利要求3所述单克隆抗体3B4的可变区序列,所述抗体为单克隆抗体或单链抗体。

5.一种A型口蹄疫病毒固相竞争ELISA检测试剂盒,其中,所述试剂盒包括有效量的权利要求1所述单克隆抗体2E11、有效量的A型口蹄疫病毒抗原、有效量的酶标记的权利要求3所述单克隆抗体3B4,对A型口蹄疫病毒抗原抗体反应进行检测的检测试剂,支持介质,所述单克隆抗体2E11包被在支持介质上。

6.根据权利要求5所述的检测试剂盒,其中,所述单克隆抗体2E11含量为6~15μg/ml,所述A型口蹄疫病毒抗原含量为50~400μg/ml,所述单克隆抗体3B4含量为10~18μg/ml,所述支持介质为微滴定板。

7.根据权利要求6所述的检测试剂盒,其中,所述单克隆抗体2E11含量为10μg/ml,所述A型口蹄疫病毒抗原含量为200μg/ml,所述单克隆抗体3B4含量为12μg/ml。

8.根据权利要求5所述的检测试剂盒,其中,所述试剂盒还包括样品稀释液、洗涤液、显色液、终止液、阳性猪血清对照以及阴性猪血清对照;所述样品稀释液为含有脱脂奶的磷酸盐缓冲液,所述洗涤液为含有Tween-20的磷酸盐缓冲液,所述磷酸盐缓冲液,pH值为7.4,其1L体积配方为:NaCl 8.0g、KCl 0.2g、Na2HPO4·12H2O 2.9g、KH2PO40.24g;所述显色液包括显色液A和显色液B,所述显色液A含TMB 20mg、无水乙醇10ml,并用ddH2O定容至100ml;所述显色液B含柠檬酸2.1g、无水Na2HPO4 2.82g、0.75%(V/V)的过氧化氢尿素0.64ml,并用ddH2O定容至100ml;所述终止液为2mol/L H2SO4

9.根据权利要求8所述的检测试剂盒,其中,所述样品稀释液为含有10%(W/V)脱脂奶的磷酸盐缓冲液,所述洗涤液为含有0.05%(V/V)Tween-20的磷酸盐缓冲液;所述阳性对照为A型口蹄疫病毒抗原的高免血清,所述阴性对照为无口蹄疫抗体的猪血清。

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