[发明专利]一种ITS2序列扩增通用引物、鉴定中药材的方法及试剂盒有效
| 申请号： | 201911203122.X | 申请日： | 2019-11-29 |
| 公开（公告）号： | CN110747290B | 公开（公告）日： | 2022-05-17 |
| 发明（设计）人： | 石林春;刘金欣;孔维军;冯继承;何志一;唐先明;马宏宇 | 申请（专利权）人： | 中国医学科学院药用植物研究所;黑龙江省药品审核查验中心;哈尔滨市食品药品检验检测中心 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895;C12Q1/686;C12N15/11 |
| 代理公司： | 上海宛林专利代理事务所(普通合伙) 31361 | 代理人： | 徐静杰 |
| 地址： | 100193 北*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 its2 序列 扩增 通用 引物 鉴定 中药材 方法 试剂盒 | ||
1.一种ITS2序列扩增通用引物，其特征在于，所述ITS2序列扩增通用引物的正向引物序列如SEQ ID No.1所示，反向引物序列如SEQ ID No.2所示。
2.根据权利要求1所述的ITS2序列扩增通用引物在中药材鉴定中的应用。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述中药材为植物类药材。
4.一种鉴定中药材的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：
步骤1、对中药材供试品进行预处理，提取其基因组DNA；
步骤2、以步骤1中提取的所述基因组DNA为模板，使用ITS2序列扩增通用引物对其进行PCR扩增，所述ITS2序列扩增通用引物的正向引物序列如SEQ ID No.1所示，反向引物序列如SEQ ID No.2所示；
步骤3、采用琼脂糖凝胶电泳法对步骤2中得到的PCR扩增产物进行检测。
5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述方法还包括：对有PCR扩增条带的基因组DNA进行序列测定，测序引物与所述ITS2序列扩增通用引物相同。
6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述方法还包括：对测序结果进行序列拼接，获得所述中药材供试品的DNA条形码序列。
7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述方法还包括采用数据库对所述DNA条形码序列进行BLAST鉴定，判断所述中药材供试品的物种。
8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述数据库包括中药材DNA条形码鉴定系统和GenBank数据库BLAST鉴定系统。
9.根据权利要求4-8中任一所述的方法，其特征在于，所述中药材为植物类药材。
10.一种用于中药材鉴定的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包含如权利要求1所述的ITS2序列扩增通用引物。
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