[发明专利]一种快速突变Y染色体STR分型系统、下一代测序分型试剂盒及分型方法和应用

权利要求书

1.一种快速突变Y染色体STR下一代测序分型试剂盒，其特征在于：所述下一代测序分型试剂盒包括下一代测序定制panel试剂盒，所述下一代测序定制panel试剂盒中包括扩增19个基因座的68条PCR扩增特异性引物，所述PCR扩增特异性引物的核苷酸序列如SEQ IDNO.1~SEQ ID NO.68所示，所述19个基因座为DYS630、DYS464、DYF403S1a、DYF403S1b1、DYF403S1b2、DYF399S1、DYS518、DYS527、DYS713、DYS612、DYS627、DYS526a、DYS526b、DYF404S1、DYF387S1、DYS449、DYS547、DYS570、DYS576。

2.根据权利要求1所述的快速突变Y染色体STR下一代测序分型试剂盒，其特征在于：所述下一代测序定制panel试剂盒还包括FuPa试剂、Ampliseq CD Indexes和Lib Amp Mix。

3.根据权利要求1所述的下一代测序分型试剂盒，其特征在于：所述下一代测序分型试剂盒还包括MiSeq上机测序试剂。

4.一种快速突变Y染色体STR下一代测序分型方法，其特征在于：用权利要求1~3任一项所述快速突变Y染色体STR下一代测序分型试剂盒进行样品检测。

5.根据权利要求4所述的快速突变Y染色体STR下一代测序分型方法，其特征在于：所述方法至少包括以下操作步骤：

步骤a、提取待测血液的DNA，定量，采用上述试剂盒中的68条PCR扩增特异性引物构建文库；

步骤b、对所述文库进行片段检测，定量；

步骤c、根据步骤b的定量结果，对文库中的样本进行均一化，然后变性、稀释，测序；

步骤d、将测序结果进行序列对比，得到分型结果。

6.根据权利要求5所述的快速突变Y染色体STR下一代测序分型方法，其特征在于：步骤a中构建文库的操作包括靶片段扩增，扩增子部分消化，连接标签接头序列，文库一次清洗，文库扩增，文库二次清洗；所述靶片段扩增的引物为所述68条扩增特异性引物；和/或

步骤c中所述稀释为将所述文库的样本浓度稀释至18pM；和/或

步骤c中所述测序的操作在Illumina MiSeq FGx平台进行。

7.根据权利要求6所述的快速突变Y染色体STR下一代测序分型方法，其特征在于：所述靶片段扩增的PCR反应循环参数为：99℃，2min；99℃，15s，60℃，4min，21次循环；10℃，4min~24h；和/或

所述扩增子部分消化的方法为用FuPa试剂进行扩增子部分消化，消化的参数为：50℃，10min；55℃，10min；62℃，20min；10℃，＜1h；和/或

所述文库扩增的程序为：98℃，2min；98℃，15s，64℃，1min，7次循环；10℃，4min~24h。

8.权利要求4~7任一项所述的快速突变Y染色体STR下一代测序分型方法在鉴别男性同卵双生子中的应用。