[发明专利]一种免疫细胞体外诱导培育增强免疫活性的方法在审
申请号: | 201911217453.9 | 申请日: | 2019-12-03 |
公开(公告)号: | CN110894489A | 公开(公告)日: | 2020-03-20 |
发明(设计)人: | 高德海;张建华;苏昕;王淑敏;刘丽婕;李璋 | 申请(专利权)人: | 山东发现生物技术有限公司 |
主分类号: | C12N5/0783 | 分类号: | C12N5/0783 |
代理公司: | 北京科家知识产权代理事务所(普通合伙) 11427 | 代理人: | 陈娟 |
地址: | 250100 山东省济南市*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 免疫 细胞 体外 诱导 培育 增强 活性 方法 | ||
1.一种免疫细胞体外诱导培育增强免疫活性的方法,其特征在于,包含如下步骤:
(1)采取20例健康志愿者和某省肿瘤医院血液科20例AML患者外周血25ml,运用常规单个核细胞提取法提取单个核细胞,分别放于培养基的培养孔中培养,前5d加入一定量ulCD3McAb,在培养的第5d,倒掉含有CD3McAb的培养液,即加入含有rhIL-2的SCGM培养基,隔日补充一次培养液,直至25d;
(2)运用流式细胞仪检测培养第0d、5d、10d、15d、20d及第25d的细胞数量及细胞存活率;
(3)运用流式细胞仪检测培养第0d、5d、10d、15d、20d及第25d细胞中的NK细胞百分率和T细胞百分率;
(4)采用比色法检测培养第0d、5d、10d、15d、20d及第25d分选出的NK细胞对K562细胞和RPMI8226细胞的杀伤活性。
2.如权利要求1所述的一种免疫细胞体外诱导培育增强免疫活性的方法,其特征在于,所述步骤(1)中,培养基中含有SCGM。
3.如权利要求1所述的一种免疫细胞体外诱导培育增强免疫活性的方法,其特征在于,所述步骤(1)中,前5d加入0.7ulCD3McAb。
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