[发明专利]一种快速检测DNA的实时定量PCR的添加剂、试剂盒及反应方法有效
申请号: | 201911219425.0 | 申请日: | 2019-12-03 |
公开(公告)号: | CN110804652B | 公开(公告)日: | 2023-07-25 |
发明(设计)人: | 高歌;高利飞;李静静;李振红;付光宇;吴学炜;苗拥军 | 申请(专利权)人: | 郑州安图生物工程股份有限公司 |
主分类号: | C12Q1/6851 | 分类号: | C12Q1/6851;C12Q1/689;C12Q1/14;C12R1/445 |
代理公司: | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人: | 刘伟 |
地址: | 450000 河南省*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 快速 检测 dna 实时 定量 pcr 添加剂 试剂盒 反应 方法 | ||
1.一种实时定量PCR的添加剂,其特征在于,由二甲基亚砜、甲酰胺、甘油、甜菜碱、Tween-20、海藻糖组成;二甲基亚砜浓度为100%、甘油、Tween-20浓度为100%,甲酰胺浓度为5M、甜菜碱浓度为5M、海藻糖浓度为5M,则所述二甲基亚砜、甲酰胺、甘油、甜菜碱、Tween-20、海藻糖的体积比为1.25:1:1.25:1.5:0.0015:1.2。
2.一种实时定量PCR的试剂盒,其特征在于,包含权利要求1所述的添加剂。
3.根据权利要求2所述的试剂盒,其特征在于,还包括MLV酶、Taq酶、MgCl2、dNTPs、Tricine缓冲液中的至少一种。
4.根据权利要求2或3所述的试剂盒,其特征在于,还包括DNA的扩增引物组及探针。
5.权利要求1所述的添加剂、权利要求2-4任一项所述的试剂盒在快速检测DNA的实时定量PCR中的应用。
6.根据权利要求5所述的应用,其特征在于,所述快速检测DNA的实时定量PCR的引物Tm值在65-70℃之间,探针Tm值在75-85℃之间。
7.根据权利要求5所述的应用,其特征在于,所述快速检测DNA的实时定量PCR的反应程序为92-95℃×1min-3min;80-85℃×5s-15s,65-75℃×10s-22s,35-45循环。
8.一种快速检测DNA的实时定量PCR,其特征在于,其反应体系含有权利要求1所述的添加剂,引物Tm值在65-70℃之间,探针Tm值在75-85℃之间,反应程序为92-95℃×1min-3min;80-85℃×5s-15s,65-75℃×10s-22s,35-45循环。
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