[发明专利]水稻OsNramp5-18

说明书

本发明公开了一种水稻OsNramp5^‑18突变型基因，该OsNramp5^‑18突变型基因相比日本晴水稻的OsNramp5基因序列，包含有以下碱基缺失段，即：在8875646‑8875663位置(RAP_Locus)存在[CCTACGTGGCAATTCACA/‑]18个bp的缺失。同时公开了水稻OsNramp5^‑18突变型基因在作物分子辅助育种中的应用以及在选育或制备耐盐表型水稻品种中的应用，取得了显著的技术效果。本发明还公开了用于检测、筛选或获取水稻OsNramp5^‑18突变型基因的突变体的KASP分型引物，可提高现有创新种质筛查鉴定的准确性及效率。

技术领域

本发明属于水稻诱变育种技术领域，尤其涉及一种水稻突变型基因及鉴定方法，还涉及鉴定用KASP分型引物及相关应用。

背景技术

近年来，“镉大米”事件的相继发生，稻米品质便成为大众关注的焦点。重金属Cd系一种毒性极强的累积性肾毒素和致癌物，稻米Cd是以其为主食人群摄入Cd的最主要来源。申请公布号为CN105052641A的发明专利申请公开了一种低镉水稻的筛选方法，选定湘晚籼12号作为对照，进行大田种植与盆栽种植双重试验，设置镉污染程度轻、中、重三种筛选条件，筛选得到的低镉水稻品种/品系的低镉特征特性表现为全面、稳定。虽然现有技术中对于低镉水稻的选育方法已有报道，但是都主要集中于环境压力条件下的品种筛选，少有采用诱变育种及分子育种筛选低镉水稻的相关报道。因此，加强低镉累积水稻新品种的选育，将更有利于推动安全营养型安全农产品的产业发展。

种质资源是植物遗传育种的基础，诱变育种能产生丰富的遗传变异，造成的变异率是自然变异的成千上万倍。据世界原子能机构1985年统计，当时世界各国通过诱变方法就已经育成500多个品种，同时获得大量有价值的种质资源。但诱变育种也存在诸多明显的缺陷，其中最主要的是由于突变位置随机，并且只能在M2代才能选择目标突变体，这导致创新种质的准确性及效率都很低。

随着基因定点编辑技术在植物上的普及，该技术以其精准、高效、简便的特点有效地弥补了诱变育种的缺陷，正受到植物遗传育种界的青睐。尽管基因定点编辑技术克服了诱变育种的主要缺点，但基因定点编辑技术在植物上的应用，还需要通过转基因手段，而有些重要的植物转基因体系并不成熟，限制了基因定点编辑技术的应用。诱变育种是通过物理、化学手段，不借助转基因技术，大部分植物都能通过诱变获得稳定遗传的突变种质，因此诱变育种仍有其不可替代的优势。另外，诱变育种在植物中的应用历史悠久。1927年，Muller在第三次国际遗传学大会论述X-射线诱发果蝇产生大量变异，提出诱发突变改良植物。之后，Stadler首次证明X-射线可以诱发玉米和大麦突变。Nilsson-Ehle&Gustafsson(1930)利用X射线辐照获得了茎秆坚硬、穗型紧密、直立型的大麦突变体。1934年，Tollenear利用X射线育成了第一个烟草突变品种“Chlorina”。1948年，印度利用X射线诱变育成抗干旱的棉花品种。1957年，中国农业科学院成立了我国第一个原子能农业利用研究室，随后各省也相继成立有关研究机构。20世纪60年代中期开始在水稻、小麦、大豆等主要作物上利用辐射诱变育成了新品种，在生产上得到了应用。20世纪70年代后期，植物辐射诱变育种开始应用于蔬菜、糖料、瓜果、饲料、药用和观赏植物育种。可见，诱变育种经过了长时间的检验，为世界植物的遗传育种做出了巨大贡献，不论是在科学界还是在产业界，已经成为一种被普遍接受的育种手段。

一直以来，诱变育种的通识是不对诱变当代(M1)进行突变选择，因为诱变引起的遗传变异多为隐性，并且是以嵌合体的形式存在于M1中。只有到诱变二代(M2)的分离群体中，M1产生的隐性变异才会以纯合的形式存在于M2的个体中，此时才能根据目标性状选择突变体。基于诱变育种仍具有不可替代的优势，我们希望能解决其选择到有益突变以及目标基因突变效率低的问题。

发明内容