[发明专利]一种土贝母药材UPLC特征图谱的构建方法及其成分含量测定方法

权利要求书

1.一种土贝母药材UPLC特征图谱的构建方法，其特征在于，包含如下步骤：

（1）精密称取土贝母药材粉末，制备得到土贝母药材供试品溶液；

（2）将土贝母药材供试品溶液采用超高效液相色谱仪分析，得到土贝母药材UPLC特征图谱；

所述超高效液相色谱仪分析的色谱条件为：采用规格为2 .1× 100mm，1 .6μm的Waters Cortecs T3色谱柱，以乙腈为流动相A，以0 .05~0 .15%的磷酸水溶液为流动相B，进行梯度洗脱，柱温为20~40℃；流速为0.2~0.4ml/min；检测波长为180~220nm，进样量为0.5~1 .5µl；

所述梯度洗脱条件为：0~4min，流动相A的体积分数变化为5%~11%，流动相B的体积分数为95%~89%；4~7min，流动相A的体积分数变化为11%~20%，流动相B的体积分数变化为89%~80%；7~21min，流动相A的体积分数变化为20%~28%，流动相B的体积分数变化为80%~72%；21~30min，流动相A的体积分数变化为28%~32%，流动相B的体积分数变化为72%~68%；30~33min，流动相A的体积分数变化为32%~35%，流动相B的体积分数变化为68%~65%；33~38min，流动相A的体积分数为35%，流动相B的体积分数为65%。

2.根据权利要求1所述的土贝母药材UPLC特征图谱的构建方法，其特征在于，所述的供试品溶液的制备方法为：取土贝母药材粉末0 .4~0 .6g，精密称定，精密加入40~60%乙醇20~30ml，称定重量，超声处理20~40分钟，放冷，再称定重量，用40~60%乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

3.一种土贝母药材的成分含量测定方法，其特征在于，包括如下步骤：

（1）分别吸取对照品溶液和待测土贝母药材样品溶液注入超高效液相色谱仪，测定相应峰面积；

（2）通过外标法计算土贝母苷甲的含量；

（3）再通过一测多评法计算土贝母苷乙、土贝母苷丙的含量；

所述超高效液相色谱仪分析的色谱条件为:采用规格为2.1× 100mm，1 .6μm的WatersCortecs T3色谱柱，以乙腈为流动相A，以0 .05~0 .15%的磷酸水溶液为流动相B，进行梯度洗脱，柱温为20~40℃；流速为0.2~0.4ml/min；检测波长为180~220nm，进样量为0.5~1 .5µl；

所述梯度洗脱条件为：0~4min，流动相A的体积分数变化为5%~11%，流动相B的体积分数为95%~89%；4~7min，流动相A的体积分数变化为11%~20%，流动相B的体积分数变化为89%~80%；7~21min，流动相A的体积分数变化为20%~28%，流动相B的体积分数变化为80%~72%；21~30min，流动相A的体积分数变化为28%~32%，流动相B的体积分数变化为72%~68%；30~33min，流动相A的体积分数变化为32%~35%，流动相B的体积分数变化为68%~65%；33~38min，流动相A的体积分数为35%，流动相B的体积分数为65%。

4.根据权利要求3所述的土贝母药材的成分含量测定方法，其特征在于，所述对照品溶液的制备方法为：取土贝母苷甲、土贝母苷乙及土贝母苷丙对照品，精密称定，加甲醇制成每1ml含土贝母苷甲80~120μg、土贝母苷乙40~60μg、土贝母苷丙60~100μg的对照品溶液。

5.根据权利要求3所述的土贝母药材的成分含量测定方法，其特征在于，所述待测土贝母药材样品溶液的制备方法为：取土贝母药材粉末0 .4~0 .6g，精密称定，精密加入40~60%乙醇20~30ml，称定重量，超声处理20~40分钟，放冷，再称定重量，用40~60%乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

6.权利要求1~5任一所述的土贝母药材UPLC特征图谱的构建方法或土贝母药材的成分含量测定方法在检测和鉴别土贝母药材中的应用。