[发明专利]一种血清C1q补体的检测试剂盒及制备方法

说明书

本发明涉及一种血清C1q补体的检测试剂盒及制备方法。其特征在于：包括试剂R1和试剂R2，所述试剂R1包括：作为第一缓冲液的三羟甲基氨基甲烷、作为表面活性剂的十二烷基硫酸钠、作为稳定剂的牛血清白蛋白、同样作为表面活性剂的曲拉通、抗坏血酸氧化酶、亚铁氰化钾、亚硝酸钠以及作为防腐剂的Proclin‑950。试剂R2包括缓冲液、保存液和胶乳微球抗体偶联物。本发明的优点是：可有效提高试剂的灵敏度、延长试剂的保存效期并增宽线性范围，保证检测结果的准确性。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，尤其涉及一种血清C1q补体的检测试剂盒及制备方法。

背景技术

C1q是构成补体C1的一个重要成分，分子量为390000，由6个相同的亚单位组成对称的六聚体，当两个以上的C1q与免疫复合物中的IgM或IgG的Fc段结合后，C1q构型发生改变，导致C1r和C1s的相继活化，启动补体经典激活途径。近年来大量的研究证明，血清C1q补体作为一种新型标志物，在体液中的含量变化与许多疾病的病理过程及预后评估密切相关。提示血清C1q补体增高，见于骨髓炎、类风湿关节炎、系统性红斑狼疮(SLE)、血管炎、硬皮病、痛风、活动性过敏性紫癜。提示血清C1q补体降低见于活动性混合性结缔组织病。常规方法中采用胶乳微球直接偶联血清C1q补体抗体或采用免疫比浊法测定血清C1q补体含量，这两种方法存在灵敏度和线性范围差的缺陷，限制了它的应用。因此，应该提供一种新的技术方案解决上述问题

发明内容

本发明的目的是：提供一种稳定性好、灵敏度高、线性范围宽的血清C1q补体的检测试剂盒及制备方法。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案是：

一种血清C1q补体的检测试剂盒，包括试剂R1和试剂R2，所述试剂R1的各组分及浓度包括：

所述试剂R2包括缓冲液、保存液和胶乳微球抗体偶联物，其中缓冲液的主要成分及浓度包括：

第二缓冲液A 30-100mmol/L

保存液的主要成分及浓度包括：

第二缓冲液B 1.2-9.8g/L

稳定剂 1.0-4.0g/L

防腐剂 0.8-2.0ml/L

胶乳微球抗体偶联物的主要成分及浓度

具体的：

所述试剂R1中的第一缓冲液为PBS缓冲液、HEPES缓冲液、MES缓冲液、GOOD’S缓冲液、Tris缓冲液中的一种或两种以上混合物。

所述试剂R2中的第二缓冲液A、第二缓冲液B为PBS缓冲液、HEPES缓冲液、甘氨酸缓冲体系、MES缓冲液、Tris缓冲液中的一种或两种以上混合物。

所述试剂R1、R2中的防腐剂分别为叠氮钠、Proclin950、Proclin300、硫柳汞中的一种或两种以上混合物。

所述试剂R1中的表面活性剂A、B分别为曲拉通、吐温20、十二烷基硫酸钠、十二烷基磺酸钠、十二烷基三甲基甜菜碱、聚乙烯吡咯烷酮、辛基苯基聚氧乙烯醚中的一种或两种以上的混合物。

所述试剂R2中胶乳微球的粒径为90-270nm，其表面修饰集团为羧基、羟基、醛基、氨基中的一种。

所述试剂R2中生物素结合血清C1q补体抗体比例为1:1-4:1，链霉亲和素结合生物素-血清C1q补体抗体比例为1:1-4:1。

所述试剂R1中的表面活性剂A为十二烷基硫酸钠，表面活性剂B为曲拉通。