[发明专利]一种快速发现微生物发酵过程早期染菌的方法

权利要求书

1.一种用于发现种子液或发酵液早期染菌的方法，其包括以下步骤：

提供种子液或发酵液取样样品，其中，发酵液取样样品由以下获得：准备培养基接入待进行发酵的菌种开始发酵，发酵进行一段时间当发酵液达到给定OD值之前，取出发酵液取样样品；

用血球计数板计算依上述获得的取样样品的菌浓度，根据所述取样样品的菌浓度来确定所述取样样品的待浓缩倍数，所述浓缩倍数为足以将所述取样样品浓缩至适合在显微镜下观察的给定的镜检菌浓度；

按照确定的浓缩倍数，将所述取样样品浓缩至所述给定的镜检菌浓度；

在显微镜下在给定面积内观察浓缩后样品，确定有无杂菌的存在以及杂菌的数量；

基于浓缩后样品在给定面积内所包含的杂菌的有无和数量来判定种子液或发酵液是否存在染菌现象。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述给定OD值为0.8～2，优选1.0～1.8，进一步优选1.2～1.5。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述镜检菌浓度的范围在1×10¹¹(RBCs)/L至5×10¹¹(RBCs)/L，优选1.5×10¹¹(RBCs)/L至4.5×10¹¹(RBCs)/L，进一步优选2×10¹¹(RBCs)/L至4×10¹¹(RBCs)/L。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述浓缩方法为采用滤膜通过真空抽滤来浓缩。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在显微镜下观察浓缩后样品时，所需要观察的给定面积为至少3.39cm²。

6.根据权利要求1至5的任一项所述的方法，其特征在于，发酵菌种为球菌、杆菌或真菌，进一步优选所述球菌为兽疫链球菌，所述杆菌选自乳酸杆菌或希式乳杆菌，所述真菌为酵母。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，对于球菌，所述给定OD值为1.0～1.5，优选为1.3，所述镜检菌浓度为3.0×10¹¹(RBCs)/L～4.0×10¹¹(RBCs)/L，优选为3.5×10¹¹(RBCs)/L。

8.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，对于杆菌，所述给定OD值为0.8～1.3，优选为1.2，所述镜检菌浓度为2.6×10¹¹(RBCs)/L～3.6×10¹¹(RBCs)/L，优选为3.1×10¹¹(RBCs)/L。

9.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，对于真菌，所述给定OD值为1.2～1.8，优选为1.5，所述镜检菌浓度为2×10¹¹(RBCs)/L～3×10¹¹(RBCs)/L，优选为2.5×10¹¹(RBCs)/L。