[发明专利]一种检测6-单乙酰吗啡的试纸条及其制备方法和应用方法

说明书

本发明公开了一种检测6‑单乙酰吗啡的试纸条及其制备方法和应用方法。该试纸条构成依次包括样品吸收垫、结合物释放垫、反应膜、吸水垫和底板；结合物释放垫上喷涂有时间分辨荧光微球标记的抗体；所述的反应膜上包被有半抗原‑载体蛋白偶联物的检测线T和羊抗鼠二抗的质控线C；本发明以时间分辨荧光微球标记抗体，采用免疫层析技术，实现6‑单乙酰吗啡的快速免疫分析。本发明还提供一种应用方法上述试纸条检测样品中6‑单乙酰吗啡的方法。本发明的优点是灵敏度高，可准确定量，检测快速、操作方便，经济实用，能够实现对大批量的6‑单乙酰吗啡样品进行快速检测和现场检测。

技术领域

本发明涉及6-单乙酰吗啡的检测，具体是一种利用时间分辨荧光微球免疫层析技术定量检测6-单乙酰吗啡的试纸条及其制备方法和应用方法。

背景技术

据联合国毒品和犯罪问题办公室发布的2018年《世界毒品报告》全面概述了阿片剂、可卡因、大麻、苯丙胺类兴奋剂和新型精神活性物质的供需情况及其对健康的影响。海洛因吸食和注射吸收良好，可大量穿透血脑屏障，迅速产生作用。服用海洛因后人体就会产生快感、幻觉感，导致依赖，甚至成瘾，给个人和社会造成极大的危害，对海洛因的检测已经引起社会的广泛关注。海洛因进入人体后在血脂酶的作用下迅速代谢成6-单乙酰吗啡，然后进一步在肝脏代谢成吗啡并与葡醛酸结合。体内吗啡可来源于滥用海洛因的代谢，也可来源于含吗啡或可待因的药物。而单乙酰吗啡仅来源于海洛因的代谢。因此，单乙酰吗啡的定性检出可作为确认滥用海洛因的证据。

目前检测6-单乙酰吗啡的常用方法有：酶联免疫吸附测定(ELISA)、放射免疫测定(RIA)、气相色谱-质谱联用法、液相色谱及液相色谱-质谱联用法等。这些色谱方法具有很好的灵敏度和特异性，但操作复杂，通量不高，耗时较长，仪器设备昂贵。酶联免疫吸附测定(ELISA)以及胶体金免疫层析法是目前国际公认的主流技术，这两种方法具有检测速度快，价格便宜，操作简单等优点。但ELISA检测仍需专业人员，且需要较长时间显示结果；胶体金法能对6-单乙酰吗啡进行定性分析，操作简单，检测时间较短，但灵敏度低、人为因素干扰较大。

综上所述，目前6-单乙酰吗啡的检测技术尚不成熟，开发一种灵敏度高、操作简便并且能够实现对大批量样品进行快速检测的产品和方法成为迫切需要解决的问题。

发明内容

本发明的目的在于克服现有的检测6-单乙酰吗啡的方法存在的操作复杂、耗时较长，并且不能够实现对大批量样品的快速检测的特点，提供一种操作简单、灵敏度高、检测速度快、成本低的检测6-单乙酰吗啡的试纸条及其制备方法和应用方法，以实现对大批量的6-单乙酰吗啡样品进行快速检测和现场监控。

为了实现本发明的目的，本发明的一种检测6-单乙酰吗啡的试纸条采用以下技术方案：一种检测6-单乙酰吗啡的试纸条，包括样品吸收垫、结合物释放垫、反应膜、吸水垫和底板；其特征在于：所述的结合物释放垫上喷涂有时间分辨荧光微球标记的抗体；所述反应膜上包被有半抗原-载体蛋白偶联物的检测线和羊抗鼠二抗的质控线。

所述样品吸收垫、结合物释放垫、反应膜和吸水垫均粘贴在底板上且其中任意相邻两个沿上下方向部分叠加。

所述结合物释放垫的1/3-1/2被覆盖于样品吸收垫下。

所述时间分辨荧光微球是将直径为100nm-500nm的稀土离子作为标记物，时间分辨荧光微球的表面修饰有功能基团，用于蛋白、抗体和核酸的共价偶联。

所述时间分辨荧光微球的激发波长为300-400nm，发射波长为500-700nm。

所述样品吸收垫为玻璃纤维素膜。

所述结合物释放垫为玻璃纤维或聚酯材料。

所述反应膜为硝酸纤维素膜或醋酸纤维素膜。

所述底板为PVC底板或其他硬质不吸水的材料。

所述吸水垫为吸水纸。