[发明专利]用于特异性识别外泌体的替代模板印迹聚合物及其应用

权利要求书

1.用于特异性识别外泌体的替代模板印迹聚合物，其特征在于：可按如下步骤制备获得：

（1）将粒径分布在40-100nm的替代模板超声分散于致孔剂中制备成替代模板分散液，替代模板与致孔剂的质量比为0.5-2:0.5-5，其中替代模板为二氧化硅纳米颗粒、聚苯乙烯纳米颗粒、聚乳酸纳米颗粒、聚乳酸-羟基乙酸纳米颗粒中的一种或二种以上，致孔剂为水、二甲基亚砜、乙腈、甲苯、二甲基甲酰胺、四氢呋喃中的一种或二种以上；

（2）将功能单体和交联剂溶解到含引发剂的致孔剂溶液中，与步骤（1）中的替代模板分散液混合均匀，制备成预聚合溶液；

其中，功能单体为丙烯酰胺、N-叔丁基丙烯酰胺、N-异丙基丙烯酰胺、2-（二乙胺基）丙烯酸乙酯、甲基丙烯酸二甲氨基乙酯、甲基丙烯酰氧乙基三甲基氯化铵中的一种或二种以上或氨丙基三乙氧基硅烷、氨丙基三甲氧基硅烷中的一种或二种以上；交联剂为乙二醇二甲基丙烯酸酯、N,N-亚甲基双丙烯酰胺、二乙烯基苯中的一种或二种以上；引发剂为偶氮二异丁腈、偶氮二异丁基脒盐酸盐、过硫酸铵和四甲基乙二胺体系中的一种或二种以上；致孔剂为水、二甲基亚砜、乙腈、甲苯、二甲基甲酰胺、四氢呋喃中的一种或二种以上；

（3）将预聚合溶液室温超声5-60min，预聚合溶液中通氮气5-30min除氧后，在50-70℃下搅拌聚合反应12-48h，得到块状聚合物；

（4）将块状聚合物粉碎、研磨、筛分，得到粒度在10-50μm的粉末状聚合物；

（5）采用刻蚀剂或高温烧蚀的方法，刻蚀或烧蚀除去替代模板，用水洗涤后，50-70℃真空干燥6-48h，即得到用于特异性识别外泌体的替代模板印迹聚合物。

2.如权利要求1所述的用于特异性识别外泌体的替代模板印迹聚合物，其特征在于：

步骤（2）中，替代模板分散液：功能单体：交联剂：引发剂的质量比为0.05-0.5:0.01-1.5:0.1-10:0.01-1.5;

步骤（5）中，刻蚀剂为质量浓度≥40%的氢氟酸，搅拌，刻蚀时间为3-72h；高温烧蚀的温度为300-1000℃，时间为3-24h。

3.如权利要求1所述的用于特异性识别外泌体的替代模板印迹聚合物，其特征在于：

步骤（2）中，替代模板分散液：功能单体：交联剂：引发剂的质量比为0.1:0.02:0.5:0.03;

步骤（5）中，刻蚀剂为质量浓度≥40%的氢氟酸，搅拌，刻蚀时间为3-72h；高温烧蚀的温度为800℃。

4.一种权利要求1或2所述的用于特异性识别外泌体的替代模板印迹聚合物作为分离材料在富集纯化液体样品中外泌体的应用。

5.按照权利要求4所述的应用，其特征在于：

所述用于特异性识别外泌体的替代模板印迹聚合物作为基质分散固相萃取或固相萃取柱的填料用于富集纯化食品、血液、尿液、脑脊液、精液、组织液、淋巴液、唾液、乳汁或细胞培养液中的外泌体。

6.按照权利要求4所述的应用，其特征在于：所述用于特异性识别外泌体的替代模板印迹聚合物具有较高的选择性，将其应用于样品前处理可以降低初始样品需求量。