[发明专利]一种包埋后的番茄红素的检测方法有效
申请号: | 201911231036.X | 申请日: | 2019-12-04 |
公开(公告)号: | CN110824065B | 公开(公告)日: | 2022-07-26 |
发明(设计)人: | 王颖;钱一帆;胡浪;陈素玲 | 申请(专利权)人: | 南京中科药业有限公司;中科健康产业集团股份有限公司 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02;G01N30/06;G01N30/74;G01N30/54 |
代理公司: | 北京思创大成知识产权代理有限公司 11614 | 代理人: | 尹慧晶 |
地址: | 211102 江苏省*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 包埋 番茄 检测 方法 | ||
1.一种包埋后的番茄红素的检测方法,先将待测样品进行前处理得到待测液,再通过高效液相色谱法检测待测液中的番茄红素,其特征在于,所述的前处理过程中,用4%的氨缓冲溶液对待测样品进行破包埋;高效液相色谱法所采用的流动相为体积比为90:10的二氯甲烷和甲醇;所述前处理的步骤具体为:先将样品研磨均匀后,称取80~120mg置于100 mL棕色容量瓶中,加入10~30mL 4%氨缓冲溶液于水浴中超声;待溶液冷却至室温后用含抗氧化剂的四氢呋喃溶液定容,搅拌后静置,待溶液澄清后吸取1.0 mL上清液置于10 mL棕色容量瓶中;最后再用体积比为90:10的二氯甲烷和甲醇溶液流动相溶液定容至刻度线,得到待测液;所述4%氨缓冲溶液的配制方法为:先将143 mL氨水用纯净水稀释定容至1 L,再用磷酸调节pH至9.8。
2.根据权利要求1所述的包埋后的番茄红素的检测方法,其特征在于,所述抗氧化剂在四氢呋喃中的浓度为0.2~1.0g/L。
3.根据权利要求2所述的包埋后的番茄红素的检测方法,其特征在于,所述的抗氧化剂为二丁基羟基甲苯、没食子酸、没食子叔丁酯或特丁基对苯二酚中的一种或几种。
4.根据权利要求3所述的包埋后的番茄红素的检测方法,其特征在于,所述的抗氧化剂为二丁基羟基甲苯。
5.根据权利要求1所述的包埋后的番茄红素的检测方法,其特征在于,所述高效液相色谱法采用的色谱条件为:
色谱柱:C18柱
柱温:30℃
流速:0.6~0.8mL/min
流动相:二氯甲烷:甲醇的体积比为90:10
紫外检测器检测波长:472nm
进样量:5µL。
6.根据权利要求1所述的包埋后的番茄红素的检测方法,其特征在于,所述水浴温度为50~60℃,水浴中超声时间为15~25 min。
7.根据权利要求1所述的包埋后的番茄红素的检测方法,其特征在于,所述含抗氧化剂的四氢呋喃溶液定容后,搅拌的时间为15~25 min。
8.根据权利要求1所述的包埋后的番茄红素的检测方法,其特征在于,在用高效液相色谱法检测前先配制标准曲线溶液,标准曲线溶液的配制方法为:
(1)配制标准贮备液:精密称取6.0mg番茄红素标准品置于25ml棕色容量瓶中,先用22.5 ml二氯甲烷溶解,再用甲醇稀释至刻度线,配制得到0.2mg/mL番茄红素标准贮备液,瓶中充满氮气后密封,置于0℃保存,备用;
(2)配制标准曲线溶液:取上述0.2mg/ml的番茄红素标准贮备液,用流动相分别配制成浓度为4μg/ml、8μg/ml、12μg/ml、16μg/ml、20μg/ml的标准曲线溶液。
9.根据权利要求8所述的包埋后的番茄红素的检测方法,其特征在于,所述高效液相色谱法分离检测待测液中的番茄红素的方法为:将所述标准曲线溶液分别在色谱条件下进样,以浓度为横坐标,峰面积为纵坐标,得到标准曲线方程;将前处理得到的待测液用针式滤膜过滤后,在相同的色谱条件下进样,经反相高效分离色谱柱分离后,由紫外检测器检测,通过保留时间对待测样品进行定性;根据上述标准曲线方程,利用保留时间和峰面积计算得到待测样品中番茄红素的含量。
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