[发明专利]一种中药方剂大承气汤的高效液相色谱分析方法

说明书

本发明涉及药物分析领域，一种中药方剂大承气汤的高效液相色谱分析方法。所述方法为：(1)供试品的制备：精密取大承气汤，以无水乙醇稀释并定容，摇匀，离心，取上清液，过滤，取续滤液，即得供试品溶液；(2)高效液相色谱测定：精密吸取供试品溶液，注入高效液相色谱仪测定。本发明能同时测定大承气汤中10种药效主要成分，操作便利，且为指纹图谱的建立提供了依据。本发明适用于由不同大黄炮制品制备的大承气汤的有效成分的测定，适用性范围广。

技术领域

本发明涉及药物分析领域，一种中药方剂大承气汤的高效液相色谱分析方法。

背景技术

大承气汤出自汉代张仲景的《伤寒论》，由大黄、枳实、厚朴和芒硝组成，是泻法的代表方剂，具有峻下热结的药效，主治阳明腑实证、热结旁流和里热实证等。中药大黄的主要活性成分是蒽醌类化合物，以游离型与结合型两种形式存在。大黄蒽醌类成分是中药大黄的泻下活性成分之一，厚朴中的厚朴酚类具有抗病原微生物和调整胃肠运动等作用，枳实中的黄酮类具有对胃肠道平滑肌、抗炎和利尿等药理作用。以上这些活性成分是大承气汤药理作用的主要物质基础，也是质量控制常用的指标物。

文献1(篇名：大承气汤的质量控制研究，作者：历淑芬等)中公开了一种大承气汤的HPLC分析方法，具体方法为：采用AgilentZorbax SB-C18色谱柱(250mm×4.6mm，5μm)，甲醇-0.1％磷酸水溶液梯度洗脱，流速1.0mL·min^-1，进样量10μL，柱温25℃，双波长检测，芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷的检测波长为280nm，芦荟大黄素、大黄酸、和厚朴酚、厚朴酚、大黄素、大黄酚的检测波长为254nm。但该方法中并未能测定大承气汤中的大黄素甲醚的成分。

文献2(篇名“大承气汤”颗粒质量标准的研究，作者：魏俊峰)中公开了一种大承气汤中的大黄素甲醚的成分的高效液相分析方法，但该方法测定种类较小，只能测定大黄素、大黄酚、大黄酸、大黄素甲醚等4种成分。

目前尚未发现一种同时测定由不同炮制品大黄组成的大承气汤中柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、芦荟大黄素、大黄酸、和厚朴酚、厚朴酚、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚等10种成分的报道。

发明内容

为了克服现有技术存在的不足，本发明提供一种中药方剂大承气汤的高效液相色谱分析方法。

本发明的目的可以通过以下技术方案来实现：

一种中药方剂大承气汤的高效液相色谱分析方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

(1)供试品的制备：精密取大承气汤，以无水乙醇稀释并定容，摇匀，离心，取上清液，过滤，取续滤液，即得供试品溶液；

(2)高效液相色谱测定：精密吸取供试品溶液，注入高效液相色谱仪测定；其中，步骤(2)中，色谱条件如下：采用C18键合硅胶色谱柱；柱温为30℃，以乙腈为流动相A，0.1％(V/V)的磷酸水溶液为流动相B，流动相的流速为1mL/min；

梯度洗脱：

0～16min，流动相A的体积百分比由2％变化至11％，流动相B的体积百分比由98％变化至89％，检测波长为280nm；

16～37min，流动相A的体积百分比由11％变化至19％，流动相B的体积百分比由89％变化至81％，检测波长为280nm；

37～46min，流动相A的体积百分比由19％变化至24％，流动相B的体积百分比由81％变化至76％，检测波长为280nm；

46～50min，流动相A的体积百分比由24％变化至30％，流动相B的体积百分比由76％变化至70％，检测波长为254nm；

50～58min，流动相A的体积百分比由30％变化至46％，流动相B的体积百分比由70％变化至54％，检测波长为254nm；