[发明专利]启脾丸及其半成品指纹图谱测定方法

权利要求书

1.一种启脾丸及其半成品指纹图谱的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)启脾丸成品指纹图谱检测

(a)启脾丸供试品溶液的制备：取启脾丸适量，剪碎、精密称定，加入水饱和正丁醇、甲醇、乙醇或与磷酸水溶液混合一定比例的甲醇、乙醇中的一种溶剂提取，定容，过滤，滤液作为供试品溶液；

(b)启脾丸供试品溶液的测定：吸取供试品溶液注入液相色谱仪，以高效液相色谱法采用梯度洗脱进行测定，得到启脾丸半成品的指纹图谱；

上述高效液相色谱的检测波长优选203nm；色谱柱柱温为30～50℃，优选30℃；流动相A为含有0.1％～1％磷酸的水溶液，优选为流动相A中磷酸占0.4％；流动相B中乙腈与甲醇的体积比是100∶0～50∶50，优选为乙腈与甲醇的体积比是90∶10；

上述高效液相色谱梯度洗脱的程序如下，其中下述比例均为体积比：

0～9min时，流动相A∶流动相B＝90∶10～80∶20

9～35min时，流动相A∶流动相B＝75∶25～85∶15

35～55min时，流动相A∶流动相B＝81∶19～65∶35

55～70min时，流动相A∶流动相B＝75∶25～55∶45

70～105min时，流动相A∶流动相B＝65∶35～20∶80

105～135min时，流动相A∶流动相B＝30∶70～20∶80

优选下属的梯度洗脱的程序：

0min时，流动相A∶流动相B＝90∶10

9min时，流动相A∶流动相B＝81∶19

35min时，流动相A∶流动相B＝81∶19

55min时，流动相A∶流动相B＝71∶29

70min时，流动相A∶流动相B＝60∶40

105min时，流动相A∶流动相B＝25∶75

135min时，流动相A∶流动相B＝25∶75

(2)启脾丸半成品指纹图谱检测方法

(a)启脾丸半成品供试品溶液的制备：取启脾丸药粉适量，精密称定，加入水饱和正丁醇、甲醇、乙醇或与磷酸水溶液混合一定比例的甲醇、乙醇中的一种溶剂提取，定容，过滤，滤液作为供试品溶液；

(b)启脾丸半成品供试品溶液的测定：吸取供试品溶液注入液相色谱仪，以高效液相色谱法采用梯度洗脱进行测定，得到启脾丸的指纹图谱；

其中，高效液相色谱的色谱条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相A为含有0.1％～1％磷酸的水溶液，流动相B为乙腈或乙腈和甲醇的混合溶液，流动相中流动相A与流动相B的体积比随时间增加逐渐减少；检测波长为200～230nm；

上述高效液相色谱的检测波长优选203nm；色谱柱柱温为30～50℃，优选30℃；流动相A为含有0.1％～1％磷酸的水溶液，优选为流动相A中磷酸占0.4％；流动相B中乙腈与甲醇的体积比是100∶0～50∶50，优选为乙腈与甲醇的体积比是90∶10；

上述高效液相色谱梯度洗脱的程序如下，其中下述比例均为体积比：

0～9min时，流动相A∶流动相B＝90∶10～80∶20

9～35min时，流动相A∶流动相B＝75∶25～85∶15

35～55min时，流动相A∶流动相B＝81∶19～65∶35

55～70min时，流动相A∶流动相B＝75∶25～55∶45

70～105min时，流动相A∶流动相B＝65∶35～20∶80

105～135min时，流动相A∶流动相B＝30∶70～20∶80。